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文献和实验库。 克隆资源因为已克隆到Gateway改造过的载体,所以可以快速地将基因转到各种表达系统中。 图4 进入Gateway系统的各种路线 * 目前的克隆资源带有attB位点,需要与pDONR质粒重组五、触手可及的最高级表达系统 一旦您构建好Gateway入门克隆,蛋白表达和分析的大门就会向您敞开。使用Gateway技术,您可以进入到几乎是无数种的表达系统。因为没有一个单一的表达系统蛋白适合于每一种蛋白,优化基因表达的最好方法是在多个系统中分析您的蛋白(图5)。 图5 在Gateway
Kan 植物表达载体 pCAMIBA3301 植物质粒 Kan 植物表达载体 pDONR221(Kan) 植物质粒 Kan pDONR221(Zeo) 植物质粒 Zeo
M13F/T7 M13R pCR3.1 T7 BGH pCS2 SP6 T7 pDonar M13F M13R pDONR221 M13F M13R pDrive T7 SP6 pDRIveR(KAN+) T7 SP6 pDsRED1-C1 pDsRED-ex-C1-F pEGFP-N-3’(距离很近,一般不用) pDsRED2-C1(KAN+) pDsRED-ex-C1-F pEGFP-N-3’ pDSRED-N1(KAN+) pEGFP-N-5’ PDSRED-N-R
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