7-AAD（7-氨基放线菌-素D）

产品概述：
产品名称：7-AAD（7-氨基放线菌-素D）
产品规格：1 mg
产品应用方向：细胞核染色
产品保存条件：-20℃避光保存，有效期见外包装。
产品运输条件：冰袋
保质期（月）：60
产品外观：可溶于DMSO和水的红色固体
分子式：C₆₂H₈₇N₁₃O₁₆
分子量：1270.5
Ex/Em：546/647 nm
CAS号：7240-37-1
分子结构图：


产品介绍：
7-AAD是一种非渗透性的核酸荧光染料。该染料不能透过活细胞的细胞膜，但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜并与其内的DNA结合，可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞，广泛用于流式细胞仪。 7-AAD与DNA结合后可发出强烈的荧光，其荧光特性与PI相似，可被488 nm氩离子激光激发，但其发射光谱较PI窄，且发射波长更长，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用，如FITC，PE等。 以贴壁细胞（盖玻片）举例，每个样本100 μL染色工作液（10 μM），1 mg配置的工作液大概可以用于787个样本。

使用方法：
注：该操作说明适用于大多数细胞，但不同的细胞类型、细胞密度、使用的培养基以及其他一些因素都有可能影响染色效果，本说明仅供参考。 1. 储存液的制备：取适量DMSO加入到7-AAD中，配制成1-10 mM储液，该储存液可于-20℃稳定保存6个月。 2. 根据自身样本选择合适的步骤固定细胞。7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行，且仅仅染色死细胞。 3. 离心收集细胞，并用合适的缓冲盐溶液或者培养基（pH=7.4）重悬细胞。注：贴壁细胞可在盖玻片或者培养板上进行原位染色。 4. 加入适量7-AAD染色液，推荐该染料的工作浓度为0.5-10 µM，避光孵育15-60 min。注：首次实验建议在推荐的染料工作浓度范围内设置浓度梯度，从而摸索最佳的染料工作浓度，后期可用水溶性缓冲液或者培养基稀释染料储液到合适的工作液浓度，现配现用。 5. 根据其激发发射波长（Ex/Em=546 nm/647 nm）在流式细胞仪下（FL3通道）检测荧光强度或配备650 nm长通滤光片的荧光显微镜检测远红外荧光。 

注意事项：
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。