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- AMEKO
- 国产
- RC60117-500ml
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，4℃保存，6个月有效。
- 库存：
现货
- 供应商：
联硕生物
- 规格：
500ml
注意事项：无菌溶液。主要由酵母提取物、胰蛋白胨、氯化钠等组成。经高压灭菌处理。
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文献和实验相关专题 配制每升培养基，应该在950 ml去液态lb培养基 离子水中加入： 胰化蛋白胨10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。 1、LB固体培养基 1L和液体一样，加15g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素，并且倒好板。 LB固体培养基倒板 1。配制：100mlLB培养基
4．操作步骤 1）大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落，接种于3～5ml LB液体培养中，37℃振荡培养12h左右，直至对数生长期。将该菌悬液以1:100～1:50转接于100ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20～30min测一次OD600nm，至OD600nm≤0.5时停止培养；(2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中，在冰上冷却20-30min，于4℃，4000r／
培养基中，37℃振摇过夜。 （2）接种25ml过夜培养物于500ml LB培养基，37℃振摇，至OD600 达到0.4. （3）迅速将培养物置于冰浴中30min，至充分冷却。 （4）将菌液转移至预冷的离心管中，4℃下以2500r/min离心15 min，弃培养液，回收细胞。 （5）以10ml预冷的10%甘油洗涤沉淀，低温离心，共两次。 （6）加约1ml（适量）预冷的10%甘油重悬沉淀，稀释悬液100倍，测量OD600,至稀释浓度为2-3×1010个细胞/ ml （1.0 OD600约
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