小鼠心梗模型构建

一、术前准备

1. 麻醉
   • 气体麻醉：常用异氟烷（诱导浓度5%，维持浓度2%），配合氧气流量0.25-0.5 L/min，麻醉时间约1分钟。
   • 腹腔注射麻醉：3%戊ba比妥钠（80 mg/kg）或水合氯醛，麻醉后通过夹趾反射判断麻醉深度。
2. 备皮与消毒
   • 剃除胸部及腋下毛发，碘伏和75%乙醇消毒手术区域。
3. 设备调试
   • 连接呼吸机（设置频率110-130次/分钟）和心电监护仪。

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二、手术操作

1. 气管插管
   • 用直镊牵拉舌头暴露声门，插入22G静脉留置针或专用气管插管，连接呼吸机观察胸廓起伏是否与呼吸机同步。
2. 开胸暴露心脏
   • 左侧卧位，于第3-4肋间剪开皮肤和肌肉，钝性分离胸壁，撑开肋间隙暴露心脏。
   • 轻压心脏使其外翻，用湿润棉球固定心脏位置。
3. 冠状动脉结扎
   • 定位LAD：在左心耳下缘1-2 mm、肺动脉圆锥旁0.5 mm处，使用7-0或6-0丝线穿透冠状动脉前降支结扎。
   • 结扎标准：观察心脏局部颜色由红变苍白，心电图出现ST段抬高或T波倒置提示结扎成功。
4. 关胸与复苏
   • 逐层缝合胸腔（6-0缝合线），挤压胸腔排出空气防止气胸。
   • 术后逐步停用麻醉，小鼠置于恒温垫复苏。

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三、术后管理

1. 护理要点
   • 单笼饲养，观察呼吸、活动及伤口感染情况。
   • 术后24小时内死亡率较高，需避免低温、脱水等应激。
2. 存活率与成功率
   • 熟练操作下存活率可达85%，模型成功率约75%。

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四、模型评价

1. 心电图检测
   • 术后即刻及4小时检测，出现ST段抬高或T波倒置提示心肌缺血。
2. 超声心动图
   • 评估左室射血分数（EF）、短轴缩短率（FS）下降，心室扩张等指标。
3. 组织学验证
   • TTC染色：术后24小时梗死区呈白色，非梗死区红色。
   • Masson染色：7天后梗死区胶原纤维沉积（蓝色）。
4. 血清标志物
   • 检测肌钙蛋白（cTnI）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）等，术后4-24小时达峰值。

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五、注意事项与改进

1. 技术难点
   • 结扎深度需精准（隐约可见针尖），避免出血或梗死面积过大。
   • 缩短开胸时间（理想操作时间40±10秒），减少气胸风险。
2. 替代方法
   • 挤压心脏法：无需气管插管，通过快速挤压心脏暴露LAD，适用于熟练操作者。
   • 微创技术：使用导丝辅助插管或经皮结扎，减少创伤。

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六、适用场景

• 药物筛选：小鼠成本低、模型稳定，适合大规模药效评估。
• 基因研究：结合转基因小鼠探究心肌修复机制。