非特异结合性封闭液，RC61746-100ml

荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization,FISH）

放大，因此灵敏度不如间接标记的方法。实验用具及材料相关溶液的配制1）20×SSC：175.3g NaCl，88.2g柠檬酸钠，加水至1000mL（用10mol/L NaOH调pH 至7.0）。2）去离子甲酰胺（DF）：将10g混合床离子交换树脂加入100mL甲酰胺中。电磁搅拌30min，用Whatman l号滤纸滤。3）体积分数70％甲酰胺/2×SSC：35mL甲酰胺，5mL 20×SSC，10mL水。4）体积分数50％甲酰胺/2×SSC：100mL甲酰胺，20mL 20×SSC，80mL水。5）体积

ELISPOT标准操作程序（protocol）

对照孔。 4、刺激物：特异性刺激物和非特异性刺激物之分。 5、正对照孔加入10μL PHA，终浓度1-4ug/mL，该浓度能有效刺激IFN-γ的分泌。 6、加入实验者自己的刺激物（用Lympho-Spot™无血清培养基配制成10×终浓度，10μL/well）到实验孔。加完刺激物后不要再拍击ELISPOT板。有人认为拍击板子会让刺激物在孔中混合均匀。实际上，通过扩散，刺激物会很快混合均匀。拍击板子会让细胞聚集分布在孔的外周。 7、加完所有的样品之后，盖上板盖，放入二氧化碳培养箱，37°C培养18-24

蛋白免疫印迹（Western Blot）技术手册

有针对细胞内的不同蛋白专门的蛋白裂解液试剂盒供您选择。 4.11细胞裂解操作方法： （1）培养的细胞经预冷的PBS漂洗2次，裂解液中加入蛋白酶和磷酸酶抑制剂。 （2）吸净PBS，加入预冷的裂解液，（(1 ml per 107 cells/100mm dish/150cm2 flask; 0.5ml per 5x106 cells/60mm dish/75cm2 flask). （3）用细胞刮子刮取贴壁细胞，将细胞及裂解液温和地转移至预冷的微量离心