- ￥380
- AMEKO
- 国产
- RC61911-100T
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，4℃保存，12个月有效。
- 库存：
现货
- 供应商：
鹿森生物
- 规格：
100T
注意事项：属于化学转化法，可以快速的进行制备和转化，转化效率较氯化钙法稍低或相当，经无菌处理，用于质粒DNA导入细胞。
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文献和实验相关专题 DNA连接与转化 大肠杆菌的基因工程 SS方法制备感受态细菌 (又称一步法) 一、 准备工作 1、 缓冲液1×TSS的配制： 事先配制1M的氯化镁——20.3g氯化镁(6分子 水结晶)/定容于100ml去离子水 后封装，不用灭菌。 取干净的100ml 量筒和100ml 烧杯，用量筒量取100ml去离子水，加入至烧杯中，取 1 g 蛋白胨，0.5g 酵母抽提物，0.5g 氯
为6.5，混匀后用0.22um 滤器过滤除菌。储存在4度，保质期约6个月。 2、已划平板（或者用枪头沾取并稀释后涂布）并在培养箱中过夜培养的菌种——Dh5α，用于接种并振荡培养。.两个锥形瓶，分别装有30 ml和50mlLB，灭菌后置于4℃冰箱备用。 3、 若干已灭菌的 琼脂 平板，一个未加 抗生素 ，用于第二步的接种。其余做转化用。 二、 感受态制备程序： 1、 前一天晚上调单菌落至30 mlLB中过夜
臂区域如果 GC 含量过高过低，或者有重复序列，都可能在核酸外切酶切割后形成发卡结构，影响重组效率，可以使用质粒设计软件来检查同源重组臂的设计。 ⑤插入序列本身的问题：有些序列本身存在连接载体困难、连接产物不稳定、连接产物在大肠杆菌中复制困难等问题。对于这类序列可以考虑将序列打断后分步构建，或者更换载体或感受态的方式尝试解决。 2. 质粒提取量不足 质粒提取量少常见的原因可能是： ①摇菌时间过长：大肠杆菌生长已经超过对数期，细菌老化，导致细胞和 DNA 降解。 ②摇菌时间不足：细菌生长不充分
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