植物胼胝质染色液(苯胺蓝荧光染色法)，RC61540-2×2

植物自交不亲和性测定技术

于高等植物的筛管、新形成的细胞壁、花粉粒以及花粉管中，将其用苯胺蓝染色后，在紫外光激发下，可发出黄至黄绿色的荧光。因此，把授粉后经用苯胺染色的子房放到荧光显微镜下观察，可看到花粉在柱头上萌发、花粉管发育的状态，以及胼胝质在柱头表面的沉积状况等，进行判断花粉与柱头是否亲和。 实验目的是学习花期人工控制自交测定选择自交不亲和系和蕾期自交繁殖自交不亲和系的方法；掌握用荧光显微镜检测植物的自交不亲和性技术；通过本实验加深对自交不亲和系选育过程的理解。 一、试材及用具 1．试材：白菜、甘蓝

组织肥大细胞的分离

，置于装有20ml(2)液的培养皿中；用剪刀去掉组织块上肠系膜及脂肪；室温下将组织块放入装有(3)液的烧杯内轻轻晃动，洗去组织上附着的杂物。弃掉液体后洗3次，然后用剪刀将组织块剪成小于0.3cm3的小块；(2)将剪碎的组织块放入装有以下预温的液体内，37℃下轻轻拨动，洗涤；先放(6)液内洗涤2次，每次5min，再放(7)液洗涤1次，1min后，最后放(2)液内洗2次，每次10min；(3)弃掉最后的洗涤液，并用剪刀将组织块剪成1mm3的碎块分别放入几个培养皿内；(4)加入(4)液25ml，放37℃

用于检测植物组织RNA的原位杂交法1

下温育约2分钟。最好先取少量载玻片进行个别染色，以确定最佳的染色时间。因为不同类型的植物组织，染色的时间也不一样。 2．用水冲洗载玻片2次，约15秒钟，除去多余的染色液。 3．对染色后的组织切片进行快速脱水。在室温下，依次用不同稀释度的异丙醇水溶液（25％，50％，75％）洗涤载玻片。然后用100％异丙醇洗载玻片2次。 4．将载玻片在100％的二甲苯中反复浸蘸，直至所有条痕消失。 5．将载玻片在新鲜的100％二甲苯中浸蘸几次，然后浸泡在其中。进行下一步