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- 2026年03月30日
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一、模型建立原理
PTZ通过抑制γ-氨基丁酸（GABA）受体功能，降低神经元抑制性，诱发癫痫样放电。慢性PTZ点燃模型通过重复亚抽搐剂量注射，逐渐增强神经元兴奋性，模拟人类癫痫的慢性进展。
二、实验材料
- 动物选择：常用C57BL/6小鼠（野生型），其他品系如昆明小鼠需调整剂量。
- 试剂配制：
- PTZ溶液：将PTZ溶解于无菌生理盐水（0.9% NaCl），浓度为2mg/mL，现用现配。
- 注射剂量：首次建议30-35mg/kg（C57BL/6小鼠），其他品系如昆明小鼠可能需50-65mg/kg。
三、操作步骤
- 给药方案：
- 腹腔注射：每隔1天注射PTZ一次，剂量根据品系调整（如C57BL/6小鼠起始30-35mg/kg，后续可逐步递增）。
- 持续时间：通常连续注射21天，直至小鼠达到点燃标准（连续3次注射后均出现Ⅳ级及以上发作）。
- 观察与评分：
- 观察窗口：注射后至少观察30分钟，记录癫痫发作潜伏期、持续时间和行为表现；建议延长至6-24小时以监测迟发性发作。
- 癫痫分级（Racine分级改良版）：
- 0级：无异常；
- 1级：面部抽搐或静止不动；
- 2级：头部点头、肢体肌阵挛；
- 3级：全身肌阵挛抽搐；
- 4级：强直发作或跌倒；
- 5级：强直-阵挛发作；
- 6级：死亡。
- 点燃成功标准：连续3次注射后均出现Ⅳ级及以上发作，且发作潜伏期逐渐缩短。
四、注意事项
- 剂量调整：不同品系小鼠对PTZ敏感性差异大，需预实验优化剂量。
- 伦理与安全：
- 癫痫持续状态（如Ⅴ级发作）需及时终止（如地xi泮干预）；
- 死亡率控制：高剂量模型（如65mg/kg）死亡率较高，建议逐步递增剂量。
- 行为记录：建议结合视频监控和脑电图（EEG）同步记录电生理变化。
五、后续分析
模型建立后，可进行以下研究：
- 病理分析：脑组织免疫组化检测神经元损伤或胶质增生；
- 行为学测试：三箱社交实验、场景恐惧记忆等评估认知功能；
- 分子机制：检测炎症因子（如IL-1β）、凋亡相关蛋白（如TLR4/MyD88通路）或氧化应激标志物。
六、模型优势与局限
- 优势：操作简便、成本低，适合抗癫痫药物筛选及机制研究；
- 局限：急性模型与慢性点燃模型需区分（后者更贴近人类慢性癫痫）
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文献和实验性癫痫发作，为研究难治性癫痫及药物抵抗性癫痫的提供了很好的模型。常用 2 种点燃模型构建方法慢性小鼠癫痫模型（PTZ 法）：1、实验动物：SPF 级 c57BL/ 6 小鼠 ，雄性 20 - 22 g。2、建模药物：PTZ（戊四氮）sigma P6500 - 25 G3、点燃成功标准：每天给予 40 mg/kg 戊四氮，连续 21 天，连续三天 PTZ 腹腔注射后，均表现为 4 - 5 级发作，为点燃成功。大鼠癫痫模型：1、实验动物：wistar 大鼠 250 - 300 g 大鼠，雌雄兼用。2、建模药物：氯
DBA/2J系小鼠（听源阳性鼠）供科研用。也可采用一些药物来提高大鼠听源性发作阳性率。如在亚惊厥剂量的戊四唑（16mg/kg）、士的宁（1mg/kg）、若味毒（1mg/kg）或咖啡因（150mg/kg）作用基础上，给予铃声刺激，可使部分听源阴性鼠也能产生发作。上述药物所致的阳性发作率分别为47.%、66.5%、38.4%、18.1%。 3．慢性实验性癫痫模型：各种动物的大脑皮质感觉动物区是致痫敏感区之一，特别是猴极易在此区形成癫痫病灶。将铝剂注入到中央前回和中央后回比单注入中央前回易于
的克隆技术却似乎正在淡出人们的视野。在“童式”克隆鱼诞生50年后的今天，中国的克隆技术到底将何去何从? 曾经的辉煌 在中国工程院院士李宁看来，当前国际上关于克隆技术的研究依旧在火热地进行。“克隆技术并不‘冷’，每过一段时间都会有新的动植物品种被克隆出来。”表面上看起来沉静、儒雅的李宁，一谈到克隆，似乎全身的热情在一瞬间点燃。如他所说，克隆技术的最新成果，是“用一滴血克隆出几十只老鼠”。今年7月，日本的研究人员从实验鼠尾巴处提取了一滴大约15至45微升的血液，分离出其中的白血
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