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动物选择:
通常选择昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄兼用。
建模药物:
使用PTZ(戊四氮),可以从Sigma公司购买,产品编号P6500-25G。
点燃方法:
隔天一次腹腔注射PTZ 35mg/kg,持续28天,停药1周后,用相同剂量PTZ测试。
另一种方法是每天给予40 mg/kg PTZ,连续21天,连续三天PTZ腹腔注射后,均表现为4-5级发作,为点燃成功。
PTZ溶液配制:
将PTZ溶解在无菌的0.9% NaCl溶液中,配制成适当的浓度用于实验。
观察指标:
惊厥的发生时间、持续时间、严重程度、频率等方面的评估。同时,也可以通过电生理学的方法来评估惊厥的发作和持续时间。
癫痫发作评分标准(按Smialowki癫痫发作分级标准):
0级,无反应;
1级,面部运动,指鼻子、点头、奔跑;
2级,前肢痉挛;
3级,前肢痉挛伴后退;
4级,前肢痉挛伴后退及摔倒发作;
5级,摔倒、强直发作。
模型特征:
PTZ模型可以模拟临床上人类的肌阵挛癫痫全身发作症状。该模型制备方法简单,有比较高的筛选抗癫痫化合物的效率,是初次筛选癫痫药物的金标准之一
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文献和实验性癫痫发作,为研究难治性癫痫及药物抵抗性癫痫的提供了很好的模型。常用 2 种点燃模型构建方法慢性小鼠癫痫模型(PTZ 法):1、实验动物:SPF 级 c57BL/ 6 小鼠 ,雄性 20 - 22 g。2、建模药物:PTZ(戊四氮)sigma P6500 - 25 G3、点燃成功标准:每天给予 40 mg/kg 戊四氮,连续 21 天,连续三天 PTZ 腹腔注射后,均表现为 4 - 5 级发作,为点燃成功。大鼠癫痫模型:1、实验动物:wistar 大鼠 250 - 300 g 大鼠,雌雄兼用。2、建模药物:氯
DBA/2J系小鼠(听源阳性鼠)供科研用。也可采用一些药物来提高大鼠听源性发作阳性率。如在亚惊厥剂量的戊四唑(16mg/kg)、士的宁(1mg/kg)、若味毒(1mg/kg)或咖啡因(150mg/kg)作用基础上,给予铃声刺激,可使部分听源阴性鼠也能产生发作。上述药物所致的阳性发作率分别为47.%、66.5%、38.4%、18.1%。 3.慢性实验性癫痫模型:各种动物的大脑皮质感觉动物区是致痫敏感区之一,特别是猴极易在此区形成癫痫病灶。将铝剂注入到中央前回和中央后回比单注入中央前回易于
下,开颅将消毒的市售钴粉(200筛孔)约30mg,放在皮层运动区的前侧(面积为10mm2),安好电极,缝合,动物约在放置钴粉后2~3周,出现置钴对侧肢体发生阵挛,少数动物于局部阵挛后出现全身发作。 点燃效应(Kindling Effect,KE)引起发作是一种较好的慢性实验性癫痫模型。其形成方法是以一定的刺激强度和时间间隔刺激脑的一定部位。动物常选用大白鼠、猫、猴、兔等。刺激强度:大白鼠杏仁核和海马为50~400μA,猫为100~500μA,猴和狒狒为200~400μA。
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