赛默飞 23225 Pierce BCA 蛋白定量试剂盒 1

Pierce BCA 蛋白检测试剂盒是一种高精度、与去污剂兼容的蛋白检测试剂盒，用于测定蛋白浓度。Pierce BCA 试剂可准确测定蛋白质研究中遇到的大多数样品类型的蛋白质浓度。Pierce BCA 分析可用于评估全细胞裂解物、亲和柱组分、纯化蛋白质样品的产量，以及监测工业应用中的蛋白质污染。与大多数染料结合方法相比，BCA 分析受蛋白质组成差异的影响要小得多，从而提供更高的浓度准确性。

试剂盒可带或不带 Pierce 免稀释 BSA 蛋白标准品，这是一组七种预稀释的 BSA 标准品，包装在多通道移液器友好型联管中。联管包括一个空管，使用户能够添加自己的样品缓冲液以进行空白扣除。

Pierce BCA 蛋白检测试剂盒是一种高精度、与去污剂兼容的蛋白检测试剂盒，用于测定蛋白浓度。Pierce BCA 试剂可准确测定蛋白质研究中遇到的大多数样品类型的蛋白质浓度。Pierce BCA 分析可用于评估全细胞裂解物、亲和柱组分、纯化蛋白质样品的产量，以及监测工业应用中的蛋白质污染。与大多数染料结合方法相比，BCA 分析受蛋白质组成差异的影响要小得多，从而提供更高的浓度准确性。

提供试剂盒选项，包括 Pierce 免稀释 BSA 蛋白标准品，这是一组七种预稀释的 BSA 标准品，包装在多通道移液器友好型联管中。联管包括一个空管，使用户能够添加自己的样品缓冲液以进行空白扣除。

赛默飞 23225 Pierce BCA 蛋白定量试剂盒 1 L BCA 蛋白检测试剂盒的特点包括：

• 比色法——目测估计或使用标准分光光度计或读板仪在 562 nm 处测量
• 准确 — 表现出使用染料结合方法 （Bradford） 观察到的蛋白质间差异的一半
• 兼容 — 不受大多数离子和非离子去污剂的典型浓度的影响
• 检测时间短 — 孵育 30 分钟;比经典的 Lowry 方法更容易，速度快四倍
• 分析范围广 — BSA 的线性工作范围为 20 至 2000 μg/mL
• 灵敏 — 使用增强型方案进行低至 5 μg/mL 的检测
• 无需再进行连续稀释——试剂盒选项包括免稀释 BSA 蛋白标准品，在生成标准曲线时无需进行连续稀释

检测方法的工作原理

BCA 蛋白检测结合了众所周知的碱性介质中蛋白质将 Cu²⁺ 还原为 Cu¹⁺ 的方法，以及二辛可宁酸 （BCA） 对亚铜阳离子 （Cu¹⁺） 的高灵敏度和选择性比色检测。第一步是铜与蛋白质在碱性环境中螯合，形成浅蓝色络合物。在这个称为缩二脲反应的反应中，含有三个或更多氨基酸残基的肽在含有酒石酸钠钾的碱性环境中与铜离子形成有色螯合物复合物。

在显色反应的第二步中，BCA 与第一步中形成的还原（亚铜）阳离子反应。强烈的紫色反应产物是两个 BCA 分子与一个亚铜离子螯合的结果。BCA/铜复合物是水溶性的，随着蛋白质浓度的增加，在 562 nm 处表现出很强的线性吸光度。该复合物的灵敏度（检测下限）大约是第一个反应的淡蓝色的 100 倍。

该反应受蛋白质氨基酸序列中四个氨基酸残基（半胱氨酸、胱氨酸、酪氨酸和色氨酸）的强烈影响。然而，与考马斯染料结合方法（即 Bradford）不同，通用肽骨架也有助于颜色形成，有助于最大限度地减少由蛋白质组成差异引起的变异性。