尼-帕病毒（NIPAH）核酸检测试剂盒

产品名称：尼-帕病毒（NIPAH）核酸检测试剂盒
Name   ： Nipah -Virus Detection Kit
精准检测 | 快速诊断 | 助力科研
本试剂盒用一对尼-帕病毒特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用一步法荧光 RT-PCR 技术对尼-帕病毒 RNA 进行体外扩增检测，用于对可疑感染病料的病原学诊断。
技术参数
项目              参数详情
检测方法        荧光定量PCR/LAMP/RPA-LFD（可选）
保存条件       -20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融（≤5次）
适用仪器        ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
样本类型        采集疑似感染动物或人血液、脑脊液、咽拭子等样本。样品的运送过程宜在 0℃以下进行。
保存和运输    采集或处理好的样品在 2℃~8℃条件下保存应不超过 24 h；若需长期保存，应放置-70℃以下保存，冻融不超过 3 次。

操作流程（以荧光PCR为例）
1.    样本处理：血液样本直接分离血清或血浆。脑脊液样本首先在 4℃以 3000 r/min 离心 10 min，小心吸弃上层液体，保留约250 μL 上清，并用其重悬细胞沉淀。咽拭子样本直接进行病毒核酸提取。不能立即进行检验时，样本冻存于-70℃ 超低温冰箱备用。
2.    试剂配制：加入预混反应液、酶及模板，离心混匀。
3.    扩增检测：运行预设程序（如：95℃预变性2min，95℃ 15s→60℃ 30s，45循环），分析Ct值。
结果判读
    阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线；
    阴性：样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。
-    严格质控标准：每批次试剂通过灵敏度、重复性、特异性验证。
-    配套服务：提供技术培训、实验方案优化及数据分析支持。
应用案例
-    科研机构研究
检测方法的局限性
1.    样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2.    样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3.    阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4.    病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5.    不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6.    试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
7.    本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
注意事项
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
9.本产品仅供科研。
参考文献
[1]    Chua KB, Bellini WJ, Rota PA, et al. Nipah- Virus: a recently emergent deadly paramyxovirus [J]. Science, 2000, 288(5470):1432-1435. [2]    Harcourt BH, Lowe L, Tamin A, et al. Genetic characterization of Nipah -virus, Bangladesh, 2004 [J]. Emerg Infect Dis, 2005, 11(10):1594-1597. [3]    陈继明，王志亮，赵永刚，等。我国尼-帕病毒风险与控制措施初步分析[J].中国动物检疫，2005，22（1）:42-44. [4]    国家质量监督检验检疫总局. SN/T 3954-2014国境口岸尼-帕病毒RT-PCR和实时荧光RT-PCR检测方法[S].
尼-帕病毒(Nipah- virus， NiV)是一种新发现的副豁病毒，属于生物安全 4 级(BSL4)病毒。NiV 可引起猪的呼吸道疾病和人的急性发热性脑炎，并且对人具有高度致死性，人感染 NIV 后死亡率高达 40%-70%，且在 2004 年孟加拉国疫情中显示有人与人之间传播的可能性。近年来，疫情在东南亚一些国家，如马来西亚、孟加拉、印度等频频出现,引起人们高度关注。由于猪感染 NiV 后可大量繁殖和迅速传播此病毒，但症状并不明显，所以难以及时发现疫情，而我国又是养猪大国,因此 NiV 对我国构成严重威胁。 本试剂盒适用于检测的疑似感染动物或人的血液、脑脊液、咽拭子等样本中尼-帕病毒，适用于尼-帕病毒感染的辅助诊断。