HEK293细胞敲除hUSP11基因细胞系

【原创】基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol

基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9 筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol 上海南方模式生物研究中心 技术顾问 周效华   从2011年科学家实现TALEN技术，2013年科学家实现CRISPR/Cas9技术，这些技术的迅速成熟都给基础生物学研究、临床医学研究提供了更为方便和快捷的分子生物学工具。技术进步必将在未来给科学研究及基因治疗研究带来更为广泛的发力！这在2014年以来的频频出现的Cas9技术在各个领域的应用进展中可以清晰看到。欢迎感兴趣的朋友联系我交流

Nature 深度剖析：管坤良与 Alj 组研究成果为何截然相反，Hippo 通路调控乳腺癌的两面性

养基可以维持乳腺上皮细胞的增殖和分化，其对 ERα 及相关因子的影响可能与 DMEM 等标准培养基不同。 此外，虽然双方均使用了 MCF-7 细胞系，但由于癌细胞的高度异质性和基因组不稳定性，或许双方实验室的细胞是不同的亚克隆，在生理生化性质上其实有较大差异。 3. 作者认为，双方报道的机制也许都是真实的，可能只是 Hippo 通路对 ERα 在不同条件下的正向和负向调控。并且可能与不同的 Hippo 通路上游信号有关（见本推送图 1）。作者提出，管组文章 Fig 1-o 中，敲除 LATS1/2 彻底

轻松学会寻找 crisprcas9 目的基因 CDS 序列

最近 CRISPR/Cas9 基因敲除技术可谓风靡全世界的实验室，CRISPR 被称为规律成簇间隔短回文重复，其实际上就是一种基因编辑器，是细菌用以保护自身对抗病毒的一个系统。后来，研究人员发现，它似乎是一种精确的万能基因武器，可以用来删除、添加、激活或抑制其他生物体的目标基因。由于其相对于前几代基因敲除技术而言更为简便高效。所以一经问世便受到科研界的热捧。利用 Cas9 质粒建立 knock-out 细胞系实验过程主要有以下几步：1. 确定待敲除基因的靶位点；2. 设计识别靶位点识别的一对