肠道病毒 EV71 型（EV-71）核酸检测试剂盒

产品名称：肠道病毒 EV71 型（EV-71）核酸检测试剂盒
Name   ： Enterovirus type 71 Detection Kit
精准检测 | 快速诊断 | 助力科研
本试剂盒根据肠道病毒 EV71 型基因保守区设计特异性引物和荧光探针，用一步法荧光 RT-PCR 技术对肠道病毒 EV71 型RNA 进行体外扩增检测，用于对可疑感染者的病原学诊断。
技术参数
项目               参数详情
检测方法        荧光定量PCR/LAMP/RPA-LFD（可选）
保存条件       -20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融（≤5次）
适用仪器        ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
样本类型        取粪便或腹泻物置入无菌玻璃管中，用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。
保存和运输    上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

操作流程（以荧光PCR为例）
1.    样本处理：取适量黄豆颗粒大小粪便或水样腹物置于 1.5mL 离心管中，按 RNA 提取试剂盒说明书进行提取。
2.    试剂配制：加入预混反应液、酶及模板，离心混匀。
3.    扩增检测：运行预设程序（如：95℃预变性2min，95℃ 15s→60℃ 30s，45循环），分析Ct值。
结果判读
    阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线；
    阴性：样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。
-    严格质控标准：每批次试剂通过灵敏度、重复性、特异性验证。
-    配套服务：提供技术培训、实验方案优化及数据分析支持。
应用案例
-    科研机构研究
检测方法的局限性
1.    样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2.    样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3.    阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4.    病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5.    不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6.    试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
7.    本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
注意事项
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
9.本产品仅供科研。
参考文献
[1]    夏巍. 肠道病毒 EV71 基因检测技术的初步研究[J]. 南方医科大学, 2011. [2]    杨晓红, 庄宇, 代宏剑, 等. 实时荧光定量 PCR 检测儿童手足口病肠道病毒 EV71 [J]. 国际检验医学杂志, 2010. [3]    甘莉萍, 陈应坚, 杨慧. 实时荧光 PCR 技术在肠道病毒 71 型检测中的应用[J]. 中国卫生检验杂志, 2009.
本试剂盒适用于检测禽多杀性巴氏杆菌病的头部、肝脏、脾脏组织中禽多杀性巴氏杆菌 DNA 的检测，适用于禽多杀性巴氏杆菌感染的辅助诊断。