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培养细胞的裂解液制备试剂盒CellAmp™ Direct P

rep Kit for RT-PCR (Real Time) & Protein Analysis
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  • ¥1124
  • Takara已认证
  • 3733
  • 2026年04月23日
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      200 Rxns

    ■ 制品内容 (Code No.: 3733: 200次量)* 产品细节图片1
    CellAmp Washing Buffer12.5 ml × 2支
    CellAmp Processing Buffer10 ml
    DNase I for Direct RNA Prep200 μl
    5X Loading Buffer1 ml × 2支
    1 M DTT (Dithiothreitol)100 μl × 2支
    * 使用96孔板时,200孔培养细胞的反应次数。
     
    ■ 制品说明
    本制品是从96孔板或其他各种培养板培养的动物细胞中制备细胞裂解液的试剂盒。制备的细胞裂解液可直接使用One Step或Two Step Real Time RT-PCR法对mRNA表达量进行解析,或使用Western Blot方法对蛋白质表达量进行解析。使用本试剂盒快捷方便,操作简单,可在10分钟内完成从培养细胞中制备样品,不需要进行核酸精制和蛋白质提取,可以直接作为Real Time RT-PCR反应的模板或者作为Western Blot实验用的样品。另外,试剂盒中添加的SDS-PAGE用Loading Buffer中不含2-ME,可以在不含2-ME条件下进行蛋白质印迹分析。
    使用本试剂盒制备的细胞裂解液可与One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time)等One Step Real Time RT-PCR试剂组合使用,2小时内便可完成基因检测分析。如果与反转录试剂PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 等组合使用,可在30分钟内完成cDNA合成。本试剂盒可与大多数Takara的Real Time RT-PCR制品组合使用。
     
    ■ 保存
    -20℃。
    5X Loading Buffer:开封后室温保存。
    CellAmp Washing Buffer及CellAmp Processing Buffer融解后可以在4℃保存。
    请注意避免污染。
     
    ■ 注意事项
    1. 本品可与以下试剂盒组合使用
    One Step Real Time RT-PCR:
    One Step TB Green PrimeScript™ RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)(Code No. RR086A/B)
    One Step TB Green PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(Code No. RR066A/B)
    One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR064A/B)
    One Step TB Green PrimeScript™ PLUS RT-PCR Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR096A/B)
    Two Step Real Time RT-PCR:
    PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR037A/B)
    PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036A/B)
    TB Green Premix DimerEraser™ (Perfect Real Time) (Code No. RR091A/B)
    TB Green Premix Ex Taq™ II (Perfect Real Time) (Code No. RR820A/B)
    TB Green Premix Ex Taq™ (Perfect Real Time) (Code No. RR420A/B)
    Premix Ex Taq™ (Probe qPCR) (Code No. RR390A/B)
     
    2. CellAmp Washing Buffer、CellAmp Processing Buffer及5×Loading Buffer在融解过程中有析出物时,请于室温下完全融解后使用。
    3. 在细胞裂解液制备过程中要迅速进行。
    4. 试剂在分装时必须使用新的一次性枪头,连续取样时要更换枪头,不得在不同试剂中使用同一个枪头,尽量避免试剂污染。
    5. RNA制备说明。
    1) 尽量使用无菌、无RNase的一次性塑料器皿,如果不能确定是否除去RNase,则应在使用前灭菌处理。如使用玻璃器皿,则需160℃干热灭菌至少2小时,或者用0.1%的DEPC处理水在37℃处理12小时,然后高压灭菌。
    2) RNA实验用的器具和仪器建议专门使用,不要用于其它实验。
    3) 尽量使用0.1%DEPC处理过的水配制试剂,并且使用前需要灭菌。如果所用试剂不能灭菌,可以使用无菌的容器以及无菌水进行配制,在使用前过滤除菌。
    4) 样品制备的过程中还需要其他的防污染措施,包括使用无菌的一次性手套以及口罩等,防止汗水及唾液造成的污染。

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    • Real-time PCR实验攻略

      ℃冷冻柜。在制备RNA时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase的作用。 1. 将组织在液N中磨成粉末后,再以50-100 mg组织加入1 ml Trizol液研磨,注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10×106个细胞加1 ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞; 2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30 ℃下放置5分钟

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