KAPA HyperExplore 非人类序列捕获探针0.5

miRNA专家谈之二：如何绘制并验证表达谱

oligo dT的反转录反应(Qiagen)在费用、移液操作和可变性方面优于茎环结构的反转录。我们在384孔板上开展qPCR分析，每个处理组有四个样品和三次实验重复(总共12个孔)，以获得可靠、重复性好的结果。同时还包括无模板、无引物的对照。 2. Northern blotting：我们使用放射性标记的LNA寡核苷酸作为探针，进行miRNA的northern blot。许多miRNA在功能相关家族中发现，这些家族成员的种子序列为100%同源，只有3’端变化。因此，在使用qPCR

聚焦7款热门miRNA表达谱芯片

与普通DNA捕获探针相比，可提升熔解温度，使得芯片上的所有探针Tm值均一化，所有miRNA杂交温度一致，保证对所有靶点具有相同的亲和活性。杂交温度高（60度）避免非特异结合，标记无序列偏向性，效率高，无需富集miRNA，因而在灵敏度方面，LNA芯片可以检测常规DNA探针无法检测到的极其微量的miRNA。这意味着Exiqon的芯片是目前市场上最灵敏的，90%的探针能够检测浓度在10 attomolar以下的miRNA，只需30 ng总RNA，就能进行图谱分析。国内的康成生物是Exiqon miRNA