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- 详细信息
- 文献和实验
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92
- 英文名:
KAPA HyperExplore MAX 60Mb, 100000 rxn
- 供应商:
上海博耀商贸有限公司
- 规格:
100000
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文献和实验聚合酶链反应(PCR)技术的发展和应用 第一节 概述 聚合酶链反应或多聚酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR),又称无细胞克隆技术(“free bacteria”cloning technique),是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。该方法一改传统分子克隆技术的模式,不通过活细胞,操作简便,在数小时内可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增107 ~108 倍,大大提高了DNA的得率。因此,现已广泛应用到分子
由于全血中存在有很多PCR反应抑制物,例如,血红素,蛋白质,盐,抗凝剂等,使得常规的Taq聚合酶不能从全血中直接进行PCR反应。因此,现在临床上往往先要从全血中提取DNA, 但即使这样,也不能完全克服上述抑制物的影响,这也是为什么目前临床上的DNA扩增反应,常常失败的原因如果在遗传病诊断中,能够从全血中快速有效地进行DNA扩增,可以节省大量的人力,时间,费用,对临床遗传病鉴定,以及亲子鉴定是一个革命化的改进。KAPA全血直接PCR:是世界上首个专门为全血PCR改造的高效DNA多聚酶。通过直接
结合到双链DNA上。内嵌染料可以和所有其他传统扩增成分,例如水,缓冲液,MgCl2,dNTPs,Taq-聚合酶,引物和模板一起加到扩增反应管中。因为不需要设计序列特异性探针和新的引物对,这种方法是一种简便,性价比较高的实时监测方法。内嵌染料没有序列特异性,可以结合到包括非特异产物和引物二聚体在内的任何dsDNA上,因此有必要区分目标信号和假信号。内嵌染料可以在反应末尾对扩增产物进行溶解,称为溶解曲线分析。在溶解曲线分析过程中,随着温度从低于产物溶解点缓慢升到高于产物溶解点,实时仪器连续监测每个样品的荧
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