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- EK-Bioscience
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- 2025年10月30日
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2ug
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文献和实验*发表【中文论文】请标注：由上海酶研生物科技有限公司提供；
*发表【英文论文】请标注：From Shanghai EK-Bioscience Biotechnology Co., Ltd.
一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector（OpenBiosystems） 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gag,pol,和rev基因（pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2）和包被质粒（pMD2.G）（Addgene） 3. 脂质体2000（Invitrogen） 4.OptiMEM无血清培养基（Invitrogen） 5. 293T包装细胞（ATCC）
质粒转染细胞的效率受到多种因素的影响，如细胞的类型，细胞的状态，转染时细胞的密度，转染的方式（电转或化转），DNA 的质量、转染试剂的选择等。从质粒角度来看，超螺旋比例高，且内毒素残留低的质粒会更有利于提高细胞转染的效率。 pCMVβ DNA 用不同试剂盒提取，转染 Huh-7 细胞，转染效率对比 5. 质粒酶切有问题，切不开或者酶切有杂带 酶切切不开可能跟酶本身状态、酶切缓冲液、酶切温度以及质粒本身都有关系。从酶切条件考虑，在确保酶活性的前提下，选择合适的酶切缓冲液、温度
005`91(Y`HK.jpg[/img] bubuyhzhao 你的图打不开，看不到不能回答你，这个有几种原因的 华因康基因公司 正向有测通么？双峰的位置在哪里？ 华因康基因公司 关于测序的双峰问题：不一定是质粒的问题，要看具体的峰。如果正向测到的位置是单峰，但反向相同位置又是双峰，就应该是测序或引物的问题了，或者质粒的反向引物区有问题。 本文由丁香园论坛提供，想了解更多
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