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文献和实验体系存在问题。 内部阳性对照 Internal Positive Control, IPC 如果想监控每一份样本从核酸提取到逆转录以及最后的荧光定量 PCR 的过程,可以在提取之前在每个样本中加入一段外源 DNA 或 RNA(不含目的片段)(表 1),并在定量 PCR 时进行单管多重 PCR,同时检测目的基因和这段序列。在每个样本中加入特定拷贝数的 IPC,进而从该段序列的 Ct 值判断对应样品孔中的核酸富集和扩增效率。也可以选择的逆转录或者扩增的时候加入到每一个样本孔中,单独监测纯化后的核酸
a linear response of the kinase with respect to phosphorylation. ——请问这一步具体怎么做的?说明书只说了这么一点。 3、The Active PKC (part# 80-1484) is intended to be used as a positive control and can be serially diluted in Kinase Assay Dilution Buffer to a final
Active Motif ChIP 实验专家技术经验分享:如何判断 ChIP 成功与否?
抗体是否是 ChIP 级,首先都要确定抗体是否能做你的 ChIP。如果是 ChIP 级抗体,就严格遵照产品说明书做,或根据别人文章报道的方法做。如果不是 ChIP 级抗体,需要先确定是否可以做 IPIF。如果可行,那再进一步尝试是否可以用于 ChIP。比如可以尝试根据别人文章报道的方法来做。如果没有被报道过,那就只能去推测可能的结合区域,设计引物去做 qPCR 验证。如果都不能确定,那只能通过测序判断了。如果你是新手,可以同时做一个阳性对照 ChIP,比如 RNA pol II 的 ChIP(用于
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