尿调节素检测试剂盒（酶联免疫法）

人尿调节素检测试剂盒（酶联免疫法）

 

产品名称：

通用名称：人尿调节素检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：Human Uromodulin ELISA Kit - IBL

 

产品规格

96T

 

预期用途

本产品仅供科研用，不用于临床诊断。

本试剂盒可用于人血清、EDTA-血浆中尿调节素的定量检测。

 

前言简介

尿调节素是一种高度器官特异性的蛋白质，仅在肾脏的肾小管中产生。几乎所有的尿调节素都通过尿液排泄，但也有少量存在于血液中。尿中排泄的尿调节素可能以单一蛋白质的形式排泄，也可能聚集并以透明管型排泄，具体取决于尿液的性质和疾病的状态。另一方面，据报道，血清中的尿调节素更适合定量测量，因为它通常以单一物质的形式排泄。

肾脏疾病是一种肾小球和肾小管不能正常运作的疾病。症状包括蛋白尿、血尿和肿胀，但在早期阶段很少有主观症状。通过计算估计的肾小球滤过率（eGFR），可以粗略估计肾功能。肌酐或半胱氨酸蛋白酶抑制剂C值用于计算eGFR，但两者在检测前都有盲区，检测时可能只存在一半的肾功能。血液中的尿调节素水平与肾功能呈正相关，换言之，可以预期测量值可以直观地评估肾功能的变化，而无需计算eGFR，这表明血液中的尿液调节素可能足够敏感，可以检测到肾功能的轻微下降。

此外，它在急性肾小管损伤和急性间质性肾炎中也可能显示出异常高的水平，有望作为急性肾损伤诊断和治疗评估的指标。特别是，大多数急性间质性肾炎病例是由药物的副作用引起的，往往难以诊断，往往导致不可逆的肾功能下降而无法诊断。有人提出，“定期测量尿调节素”可能有助于确认肾脏中给药的安全性。

有人提出，血液中尿调节素的高低水平也与CKD患者的死亡率、心脏事件的发生率、肾功能衰竭的进展率和移植后肾功能衰竭风险有关，有望成为一种重要的生物标志物。

 

检测原理

尿调节素检测试剂盒（酶联免疫法）是固相夹心ELISA（酶联免疫吸附测定法）。微孔板上包被了第一抗体，将样本和标准品加入微孔板中发生第一次反应。反应后，加入HRP-第二抗体共轭物，发生第二次反应。洗涤除去未结合的第二抗体后，加入底物液，发生显色反应。

 

检测样本

人血清和EDTA-血浆

 

储存条件

尿调节素检测试剂盒（酶联免疫法）须2-8℃保存，有效期见试剂盒外包装

 

试剂盒成分

1  微孔板：包被抗尿调解素65C3小鼠IgG单克隆抗体                 96T x 1

2  标记抗体：HRP-抗尿调节素43C2小鼠IgG单克隆抗体Fab’        30倍浓缩，0.4mL x 1

3  标准品：重组尿调节素                                          0.5mL x 2      

4  EIA缓冲液：                                                  30mL x 1

5  标记抗体溶液：                                                12mL x 1

6  显色剂：        15mL x 1

7  终止液：        12mL x 1

8  洗涤缓冲浓缩液：                                              50mL x 1

实验所需器材(但试剂盒没有提供)

  酶标仪                   移液器和吸头

试管                     量筒和烧杯

  去离子水                 洗板机

  吸水纸                   收集容器（如干净的一次性试管）

  培养箱（37±1℃）        

  

试剂制备

1)洗涤液，使用前，用去离子水40倍稀释，每次仅稀释所需量

2）酶标记抗体，使用前，用标记抗体溶液30倍稀释，例如，若使用1条板（8孔），则30µL抗体浓缩物+870µL抗体溶液，混匀；仅在使用前制备，剩余的标记抗体浓缩物应在4℃下密封储存

3）标准品

向标准品瓶中加入0.5mL的EIA缓冲液使其完全溶解，得到浓度为18ng/mL的标准品；复溶后的标准品可冷冻储存，需避免反复冻融；

准备7支试管，并向每支试管中加入230µL的EIA缓冲液；将230µL浓度为18ng/mL的标准品加入试管1中，混匀，得到浓度为9ng/mL的标准品；将230µL试管1溶液加入试管2中，混匀，得到浓度为4.5ng/mL的标准品；连续2倍稀释制得浓度范围为0.14 - 9ng/mL的标准品

 

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