大肠杆菌感受态

产品介绍：

大肠杆菌感受态细胞是通过理化方法诱导的细胞，使其进入一个最佳的生理状态，以便摄取和整合外来DNA，可用于常规质粒的转化。丽山生物可提供多种感受态细胞产品，包括DH5α感受态、JM109感受态、Top10感受态、BL21感受态、stbl3感受态等，使用pUC19质粒进行热激转化，在严格按照使用说明进行操作时，具有较高的转化效率。

产品选择指南：

保存条件：

-80℃保存。有效期一年，避免反复冻融。通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。

注意事项：

• 感受态细胞须用干冰运输。感受态细胞应在-80°C 下保存，禁止反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
• 感受态细胞融化后，须尽快加入待转化样品，待转化样品加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10，样品体积过大会导致转化效率下降。
• 感受态细胞对温度变化非常敏感，需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。
• 感受态细胞对于机械力非常敏感。加入质粒或连接产物后，请勿用移液枪吸打，轻弹混匀即可。
• 所有步骤均在无菌条件下操作。
• 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

使用说明：

1. 将感受态细胞从-80°C拿出，迅速置于冰上融化。

2. 将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中，轻弹管壁混匀（避免用枪吸打），冰上静置30 min。

3. 42°C水浴热激90 sec后，迅速置于冰上静置2 min，切勿摇动离心管。

向离心管中加入900 μl LB或SOC液体培养基（不含抗生素），混匀后置于37°C，200 rpm摇床中复苏1 h。

4. 5,000 rpm（2,500 × g），离心1 min，弃掉900 μl上清，用剩余培养基将菌体重悬后，均匀涂布在含相应抗生素的LB固体培养基平板上。

5.  待菌液被完全吸收后，倒置平板，37°C过夜培养。