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文献和实验本身不带标签,则需要使用离子交换层析。 离子交换层析 离子交换层析推荐使用 RESOURCE 和 Capto HiRes 系列,能得到比较好的分辨率。不过要注意阴离子交换实验中不要添加阴离子型去垢剂,阳离子交换实验中则不能加入阳离子型去垢剂,以免影响层析柱载量。 离子交换之前需降低缓冲液中盐浓度,由于膜蛋白的特殊性,推荐使用脱盐柱进行此步骤,根据样品体积可选择 HiTrap Desalting 5 mL 或 HiPrep 26/10 Desalting 53 mL 两种常用柱型。最终上样体积不要超过
筛选功能,例如,用甲醇分离黄酮甙,三糖甙先被洗下来,二糖甙其次,单糖甙随后,最后是甙元。Sephadex LH-20可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂,广泛用于各种天然产物的分离,包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内酯、萜类、甾类等。 生物碱在酸性缓冲液中带正电,成为盐,HiTrap SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常相似的生物碱。相反,黄酮、醌类、皂甙、有机酸等可溶预溶于偏碱的缓冲液中,在HiTrap Q阴离子交换柱上分离效果良好。 一般多糖纯化大多使用分子筛,如Sephadex,Sephacry
来,二糖甙其次,单糖甙随后,最后是甙元。Sephadex LH-20可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂,广泛用于各种天然产物的分离,包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内酯、萜类、甾类等。 生物碱在酸性缓冲液中带正电,成为盐,HiTrap SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常相似的生物碱。相反,黄酮、醌类、皂甙、有机酸等可溶预溶于偏碱的缓冲液中,在HiTrap Q阴离子交换柱上分离效果良好。 一般多糖纯化大多使用分子筛,如Sephadex,Sephacry1。若分子量在60万以下,并需更高等
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