冷指冷凝器，磨口: 14/20;夹层长度: 100mm;包装

人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南

台中，使用体积设置为 10 µL的无菌 20 µL 移液器吸头从 60 mm 培养皿中6个较完整的类器官，并将其转移到 96 孔 U 型底板的 1 个孔中。 6. 将 96 孔板从解剖台转移到组织培养超净台中。 注意：为避免 ECM基质胶过早凝胶化，我们建议一次制备不超过 3 个细胞培养小室。      1. 将 60 µL 冷的 100%的减生长因子(GFR) ECM基质胶加入步骤 5 中的 96 孔板的每个孔中。通过移液器轻轻混合几次，避免产生任何气泡。 总体积 = 每孔130 µL。      

western-blot实验方法

1、试剂耗材的准备：（1）转膜缓冲液（48 mM Tris-HCl，39 mM 甘氨酸，0.037% SDS，20%甲醇）：（2）10 × 丽春红染液：（3）TBS 缓冲液：（4）TBST 缓冲液（含20%Tween20 的TBS 缓冲液）：（5）封闭液（含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液）：（6）一抗、二抗及抗体稀释液：参照说明书，以封闭液或TBST 进行稀释。（7）底物显色液ECL，4℃ 避光保存，现用现配。（8）显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中，可多次使用。室温避光存放

垂直电泳槽的使用

10孔梳子插入玻璃板之间。确保无气泡产生（图 7）。让浓缩胶聚合60分钟。 •在900 ml蒸馏水中稀释100 ml 10 X缓冲液，并添加SDS, 制成最后浓度为3.5mM的 SDS-PAGE电泳缓冲液。 •将两个翼型扳手均匀施力掰开，从灌胶模具中取出凝胶三明治夹。通过灌胶模具背后留的两个大孔，轻轻向上将三明治夹推出（图 8）。 •将电极放入垂直电泳槽内。贴着电极壁，将凝胶三明治夹垂直方向插入电极中（图 9）。 •把凝胶三明治夹置于合适的位置后，关闭电极门（图10）。