- ￥687.90
- 阿拉丁
- 上海
- E745616
- 2026年01月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C储存
- 英文名：
EMSA Probe SP1
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
E745616-30μl
英文名：EMSA Probe SP1
纯度或规格：10μM
SPU：E745616
CAS：-
存储温度：-20°C储存
运输条件：超低温运输
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文献和实验的能力,如果结合了那才是真正的参与转录的转炉银子, 有的入核后却不能和DNA结合,只能等着被降解! 其实总体而言大家做试验时都希望成功,但是EMSA试验技术的独特性和复杂性决定了,要想做成功EMSA试验,拿到阳性结果可总结为一句话: 把握整体,注意细节! 我觉的EMSA的整体性包括6大点:探针制备(设计,合成,标记,纯化,退火);个人实验设计(时间剃度浓度查阅文献等);核蛋白制备;浓度测定;EMSA操作;实验时竞争设计. 这六大点都是会直接影响到EMSA试验的成功
达到产生特异性条带的最大量，同时又将探针或目的蛋白与反映中其它物质非特异性结合减至最低。 二、DNA结合反应条件优化如下图： 在一支1.5ml EP管中加入如下成分，30度孵育30min，加入少量EMSA loading buffer。 1. 成分加样顺序：最主要是要注意DNA与蛋白只能在最后一步接触。DNA探针只能与非特异竞争性探针一起或在其之后加入。 2. 温度：一般均在30度，但有的蛋白如sp1，在20度较好。 3. 时间：一般孵育为10－30min，对于大部
我做NF-kB的EMSA实验方法和结果，条带不好，请大家指点！
。 （7）吸取上清，为核蛋白提取物。 （8）马上进行EMSA实验。 探针制备： 用γ-32P-ATP及T4多核苷酸激酶对合成的转录因子结合和突变型寡核苷酸的两条互补链分别进行末端标记。20 µl反应总体积中，加寡核苷酸10 pmol，10×T4多聚核苷酸激酶缓冲液2µl，γ-32P-ATP 3 pmol，T4多核苷酸激酶10 u，37 ℃反应45 min，再置于68 ℃ 10 min灭活。在离心管中加入退火反应液60 µl，互补配对的两条链的标记产物各20 µl，于95 ℃变性5min，缓慢降温
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