EMSA探针－NF-κB，10μM，阿拉丁

非放射EMSA实验技术讨论

激活－核转运检测试剂盒仅染色p65，不染色RelB、C-Rel、p50和p52。使用本试剂盒染色后NF-κB呈红色荧光，细胞核呈蓝色荧光.思考信号转导和检测的理论 我做了这样的回答(个人意见.大家可以讨论!)： 这种理论上来讲可行,但是实际操作可能拿不到你想要得结果,原因很简单,凭染色来判断是很难区分程度上的差异的,就比如做WB实验,经典的还是化学发光的方法,显色的方法只能得到信号比较强的蛋白,遇到信号比较弱的蛋白就误差很大了, 第二点,并不是所有能进核的蛋白都有结合DNA

【求助】再问几个NF－kB的问题

－kB一般是二聚体入核 主要我是想自己做p65，然后在导入细胞，在考虑P65怎么样才能入核的事情? 第3个问题，我主要是想知道，就LPS刺激细胞后，我怎么样才能确定在此情况下P65蛋白的哪个结构域激活了？怎么样去测定这个结构域？ andyzhoucang 最近做了好多次NF-KB的EMSA，上传一张，恳请大侠们帮忙。我用的探针是上海生工合成的， 图中：1道：pierce公司提供的EBNA组 2道：大鼠肾核蛋白＋标记探针组

【共享】dsDNA微阵列的原理

位点为5 bp、E2F的结合位点为8 bp, NF-κB的结合位点为10 bp, p53的结合位点为20 bp; 同一家族的转录因子其DNA结合位点在序列和长度上都比较保守, 因此一般能用共同基序(Consensus)或模体(Motif)反映转录因子的DNA结合位点。DNA结合转录因子都含有DNA结合结构域(DNA-binding domain, DBD), 该结构域负责转录因子与DNA位点的识别和结合。同一家族的转录因子一般拥有结构非常相似的DBD, 并且在与DNA结合时, 一般以同二聚体或异二聚体的形式