冰冻切片快速抗原修复液，5X，阿拉丁

免疫组化常见十大问题与解析

不完全：使用正常山羊血清或 1%～5% BSA 封闭 1h。 （5）离子相互作用造成的背景：降低抗体稀释液的离子强度。 （6）切片或细胞过于干燥或孵育温度过高：实验过程中请保持切片处于湿润状态，一抗孵育时尽量使用 4℃ 过夜孵育。 （7）内源性过氧化物酶残余：适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 （8）样本于缓冲液或抗原修复液中浸泡太久：样本在溶液中浸泡时间不要超过 24h。 Q4：为什么会出现非特异性染色，如何避免？ （1）抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加非特异性染色：由于本试剂盒使用

抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods

技术即可检测到特定抗原。 恢复表位免疫反应性的方法有很多种。即使是改变抗体稀释液的pH值或阳离子浓度这样简单的方法，也能影响抗体与其表位的亲和力。对于部分掩蔽的表位，在进行抗原修复之前，可以先尝试延长一抗的孵育时间。然而，这一步骤也需要进一步优化，包括合适的抗体浓度、孵育时间和温度。在讨论抗原修复方法时，通常将其分为两大类：蛋白酶诱导表位修复（PIER）和热诱导表位修复（HIER）。一旦优化，抗原修复的效果将非常显著。 蛋白酶诱导表位修复（PIER） 在PIER方法中，蛋白酶K、胰蛋白酶和胃

IHC原理、操作及注意事项

决定簇。通过抗原修复，使得细胞内抗原决定族重新暴露，提高抗原检测率。常用的修复方法从强到弱一般分为三种，高压加热修复、微波修复、胰酶修复。其中高压加热修复这一方法简便易操作，效果也更好。使用高压加热修复对于修复温度和时间的把握十分重要，温度越高修复时间越短，温度与修复时间呈负相关。修复结束后注意室温冷却，让蛋白自然复性。其次，尽量使用过量的抗原修复液，防止高温液体挥发干涸，对切片造成不可逆的损伤。 灭活内源性过氧化物酶和生物素 在传统的 ABC 法和 SP 法中，免疫组化反应容易受到内源性过氧化物酶和生物