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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 英文名:
Tris Acetate EDTA(TAE) Buffered Solution
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
T301890-500ml
英文名:Tris Acetate EDTA(TAE) Buffered Solution
纯度或规格:1×,无菌,DEPC处理
SPU:T301890
CAS:-
存储温度:室温
运输条件:常规运输
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文献和实验钠,5mmol/L DETA(pH8.0)4)甲醛, 甲酰胺3 仪器: 电泳装置,紫外透射观测仪二、实验程序1 甲醛变性的琼脂糖(Agarose) 凝胶的配制在250mL的锥形瓶中准确称量2g Agarose (Sigama),再加20mL 10×TAE Buffer,144mLDEPC处理过的双蒸水,微波炉中化胶,待冷却至50-60℃加EB至终浓度≤0.5μg/mL。在通风橱中加入36 mL甲醛,放置一段时间以减少甲醛蒸汽。2 RNA的甲醛变性电泳1) 样品制备,RNA总量10μg,5×甲醛凝胶电泳缓冲液
的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。因此要测定RNA分子量时,一定要用变性凝胶。在需快速检测所提总RNA样品完整性时,配制普通的1%琼脂糖凝胶即可。 三、实验材料、器具及药品 蘑菇的总RNA溶液。 电泳仪,电泳槽,电子天平,移液器,枪头,微波炉,紫外透射检测仪等。 琼脂糖,1XTAE电泳缓冲液,0.5μg/ml溴化乙锭(EB)10X载样缓冲液。 四、实验步骤 (1)用1×TAE电泳缓冲液制作琼脂糖凝胶,加1×TAE
;(5)10000×g,4 ℃ 离心 15 min,弃上清。用 70% 乙醇漂洗,10000×g 离心 5 min,弃上清, 室温蒸发乙醇;(6)用适量的无 RNase 污染的水溶解 mRNA。此 mRNA 可用于 Northern 印迹,RT-PCR 及核酸保护试验。若长期保存,可加入 3 倍体积的无水乙醇,置-70 ℃。【注意事项】(1)因为 RNA 易被 RNase 降解;整个操作不能有 RNase 的污染,同时要注意无菌操作。(2)所有试剂的配制均用 DEPC 处理过的水(3)加入 3 倍体积的 100
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