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Cytiva
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文献和实验大家提供以下标签蛋白纯化的填料和多种规格的预装柱。 His 标签蛋白填料简介 His 标签蛋白填料的选择 1 科研微量分析和制备 Cytiva 经典 Ni 填料 Ni Sepharose 6 Fast Flow(FF)和Ni Sepharose High Performance(HP)适用于实验室级别目标蛋白的分析和制备。如需快速进行目标蛋白的捕获,可选择 Ni Sepharose 6 Fast Flow(FF)填料,它可帮助您节省一半的时间以提高课题研究的进度。如对蛋白
荧光蛋白-谷丙转氨酶)使用单一亲和层析和两步亲和层析的对比实验。HisTrap HP 纯化结果显示,填料对其它含有暴露的组氨酸残基的蛋白也具有亲和作用。GST 标签与 GSTrap 4B 上的谷胱甘肽配基特异性较高,可以产生较高纯度的蛋白。两个标签组合纯化可以得到最高纯度的蛋白。 双标签绿色荧光蛋白 结语 相比于单标签的一步亲和层析,双标签两步亲和层析可得到更高纯度蛋白。对于不同蛋白,您可以尝试在目的蛋白同侧或两侧,选择不同标签组合进行构建,以提高目的蛋白特异性甚至改善溶解性。 目前,Cytiva
蛋白的损失。 如何进行柱上酶切 柱上酶切纯化路线比较简单,只需上样后加入蛋白酶,在合适的温度下进行孵育一段时间,经过清洗便可得到纯度较高的无标签的目标蛋白。 去除标签的关键在于选择高效的蛋白酶并构建相应的氨基酸识别序列。下表展示的是几种常见的内切酶及对应酶切位点。 组氨酸标签由于分子量小通常不需要去除。如有必要,可使用 TEV 蛋白酶去除组氨酸标签。由于TEV酶带有六组氨酸标签,因此可实现柱上酶切而得到高纯度无标签的目标蛋白。 PreScission
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