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脓毒症造模方法
①动物麻醉:按50mg/kg体重的剂量经腹腔注射戊巴bi妥钠,待动物麻醉成功后,腹部皮肤经碘伏消毒备皮;
②术前消毒:将动物固定于操作台上,用无菌棉球蘸取75%酒精,轻柔地消毒手术区域3次;
③选取腹部正中切口打开腹腔长约2cm,寻找盲肠,小心分离其远端与大肠的系膜,在盲肠远端1/2处用无菌4号丝线紧紧结扎,并用无菌7号针头在已结扎盲肠远端中央处贯通穿刺,轻轻挤出少量肠内容物,尽量避免损伤血管,然后把盲肠推回腹腔,关闭腹腔。
该造模方法操作简单,可重复性强,可控性高,标准化水平高,在大小动物都适用,动物与人类脓毒症相似的高动力心血管反应。但该模型属于多菌群感染,无法控制感染菌群的量,存在实验室内、年龄、性别、种族差异,要求实验人员深入了解和熟练掌握操作过程才能准确地构建CLP模型。
该模型具有与人类脓毒症相似的病理生理改变和体内炎症介质的变化规律,接近于人类脓毒症机制的模型,非常适宜用于脓毒症潜在机制研究,脓毒症治疗药物的临床前观察等研究。
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文献和实验动物模型是现代生命科学研究的重要工具,特别是基因工程小鼠和大鼠,在基因功能研究、人类生理病理机制研究及新药研发中起着不可替代的作用。近几年来,制备动物模型的基因修饰技术层出不穷,这不仅包括传统 ES 打靶、TALEN、CRISPR/Cas9, 还有 TetraOneTM 基因敲除新技术。如此繁多的技术该如何选择?本文将对这四种技术的原理、特点、缺陷及未来发展趋势作系统的介绍和对比。 1、 传统 ES 打靶基因敲除——成熟、修饰准确、效果稳定,但制作周期长达一年 基于胚胎
动物模型构建CRISPR-Cas9 系统作为最新一代基因编辑技术,能够简便高效地实现基因组精确 修饰,是制备哺乳动物疾病模型的重要工具。目前科学家利用 CRISPR-Cas9 技术在动物模型,如小鼠、大鼠、猪 和猴等研制方面做出一系列重要工作。如科学家们将 CRISPR-Cas9 系统导入小鼠受精卵,成功获得了有特定基因突变的小鼠模型,并获得近乎 100% 的基因靶向突变效率,极大地降低了基因编辑小鼠模型制备的难度和成本,有望被广泛应用。背景:使用自主研发的sgRNA设计平台为一个基因位点设计
24h-48h 后,进行转染后的其它检测步骤. 广州朗日生物技术有限公司是国内较大的对外提供技术服务的公司,致力于最前沿的生命科学技术研究。主要的研究方向有:肿瘤疾病,心血管疾病,内分泌类疾病,肾脏病学类疾病,干细胞,药物筛选等。技术中涉及的领域包括:细胞生物学、分子生物学、免疫与蛋白组学、动物模型构建、药物筛选和转基因小鼠等。并且成功建立细胞库,载体库,病毒库等,可以为广大生物医药企事业单位提供全方位的服务。并广泛提供分子生物学﹑细胞生物学等生命科学领域的实验整体技术服务及相关
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