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- Hellma
- 德国
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- 2026年04月15日
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hellma
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文献和实验40 19 0.40 0.45 92 77 62 37 110 81 68 53 30 93 67 54 41 21 80 55 44 33 15 0.45 0.50 100 75 63 51 30 90 66 55 43 25 76 54 44 34 18 65 45 36 27 13 0.50 0.55 83 63 53 42 26 75 55 46 36 21 63 45 37 28 15 54 38 30 22 11 0.55 0.60 71 53 45 36 22 63 47 39
12 39 28 22 17 8 0.65 0.70 53 40 34 28 17 47 35 30 24 14 40 29 24 19 10 34
μM）5μlNaCl 100 mM（终浓度）Tris‐Cl pH7.4 50 mM（终浓度）加水补足 50 μl将配制好的退火反应缓冲液重复混合，短暂离心后放置 PCR 仪上，运行以下程序： 90℃ 4 min， 70℃ 10 min， 55℃ 10 min， 40℃ 10 min， 25℃ 10 min。退火后的寡核苷酸可以立刻使用或者在 ‐20℃ 长期保存。三、 pCas9/gRNA 基因敲除载体的构建用 EcoRV 酶切 2 μg pCas9/gRNA 载体（inovogen）。通常
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