9-羟基喜树碱（CAS：67656-30-8）

张锋团队再获新进展！Nature 发文解析「超迷你」核酸酶 IsrB 结构及 DNA 切割机制

Activity），这些核酸酶的体积约为 Cas9 大小的 30%，具有极大的改造潜力。 图片来源：Science 2022 年 10 月 12 日，张锋实验室继续在 Nature 期刊发表了题为 Structure of the OMEGA nickase IsrB in complex with ωRNA and target DNA 的研究论文，分析了脱硫弧菌 DtIsrB-ωRNA 和靶 DNA 的复合物的冷冻电镜结构（分辨率 3.1 Å）及 DNA 靶向切割的分子机制，为下一步对 IsrB

北大伊成器团队 Nature Method 发文，揭示单碱基编辑脱靶风险！

后，相应的测序信号都出现了极大的降低。这些结果都表明了 CBE 脱靶效应的存在。 作者对脱靶现象进行了进一步细分，发现这些脱靶现象发生的靶点可以被分为 Cas9 依赖性以及 Cas9 非依赖型。 图片来源：Nature Method 为了验证 Detect-seq 的可靠性，作用将 Detect-seq 与此前被用来研究 Cas9 依赖型脱靶效应的工具进行了对比。与 GUIDE-seq 相比，Detect-seq 识别出了大部分 GUIDE-seq 在 EMX1 与 VEGFA_site_2 中识别

Nature：哈佛大学董民团队利用昆虫细胞全基因组 CRISPR 筛选，揭示杀虫毒素受体

。 与此同时，哈佛医学院 Norbert Perrimon 教授实验室于 2018 年开发了应用于果蝇 S2R+ 细胞全基因 CRISPR/Cas9 筛选的文库，利用整合酶介导的 gRNA 基因组定点整合的方法，不需要使用慢病毒转染。作者发现 pTc 毒素可以通过修饰细胞内肌动蛋白抑制 S2R+ 细胞分裂，但中毒 S2R+ 细胞基因组依然可以保持复制，进而导致中毒 S2R+ 细胞体积随着时间不断增大。 正是利用这一特征，在实际筛选中，作者巧妙地利用 30 微米孔径的细胞筛分离中毒细胞以及对毒素有耐性