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文献和实验1.判断仪器脱气机是否正常:打开purge阀,流速设为2ml/min,然后提起过滤头,让体系进一些空气,再放下过滤头,看气泡是否会减少来判断脱气机是否起作用; 2.溶剂过滤头不可超声清洗,可用35%硝酸浸泡1小时后再用溶剂清洗; 3.EDTA、乙二胺四乙酸等会对液相柱的不朽钢产生腐蚀;四氯化碳与2-异丙醇、四氢呋喃不可混合使用,但可单独使用; 4.溶剂的使用:每两天更换或重新过滤溶剂(尤其是水,需要每天更换);流动相过滤是为了去除微生
M199 + 35g NaHCO3 + 25mM Hepes + 5 mM glutamine + 50 ug/ml Gentamycin.1M Hepes: 119.1 g Hepes + 500 ml dH2 O.Media A: 1X HBSS (10X:50ml) + 10 mM Hepes (1M: 5 ml) + 5 mM EDTA (0.5M: 5ml) + 2.5 % FBS (12.5 ml) in 500 ml.Media B: RPMI1640 470 ml + Gent
G418溶于10ml 1M HEPES(pH7.3),终浓度为500mg/ml,-20℃保存。 注:实验中采用方案二时效果较好。 2.制备筛选培养基: 用培养基将G418稀释为0 ug/ml 、200 ug/ml 、300 ug/ml 、400 ug/ml、500 ug/ml 、600 ug/ml 、700 ug/ml 、800 ug/ml、900ug/ml、1000ug/ml、1100ug/ml、1200ug/ml 24孔板,每孔1ml培养基(含有G418的完全
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