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赛默飞
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文献和实验X 的原液)。上样缓冲液包括如下组分: 密度成分,如甘油或蔗糖,增加样品粘度,确保样品沉入孔中。 盐,如 Tris-HCl,为样品创造良好的离子强度和 pH 值环境。高盐浓度的上样缓冲液会产生更大片或扭曲的条带以及污点。 金属螯合剂,如 EDTA,可阻止样品中的核酸酶降解核酸。 染料 为监测样品的上样、电泳进展和 pH 值变化提供了颜色指示。部分上样缓冲液可能包含多个染料,以便有效跟踪样品中不同大小分子的迁移。 通常,上样染料都是带负电荷的小分子,因此迁移方向与核酸相同。其中有的显示pH值颜色,上样
效率,比如电转化比化学转化的效率更高。 3. 如何设计目的片段引物? PCR 引物设计,是决定实验是否成功的重要一环,现有的 PCR 设计工具,比如Primer-BLAST (NCBI)、Primer Designer Tool (Thermo Fisher)、 Primer3 等都可以针对目标序列设计出相应的引物,可以根据目标序列特征、实验室资源来选择合适的引物设计工具。如果后续通过无缝克隆的方法构建载体,在设计 PCR 引物时,还需要将同源臂序列添加到上下游引物的两端。具体添加方法可参考所用的同源
(Fisher M/4056/17)、Acetonitrile(Fisher A/0626/17)、Trypsin (Promega V528)、Trypsin resolve solution(Promega V530)、Ammonium bicarbonate(Sigma A6141)、ZipTip μC-18(Millipore ZTC18M096)、TFA(GE HealthCare)、0.2ml and 0.5ml EP tube(eppendorf)、50ml EP 0.5ml EP
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