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- 详细信息
- 文献和实验
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99
- 供应商:
赛默飞
- 规格:
福州木辰
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文献和实验ChIP protocol for X. laevis Lens1/FoxE3 enhancer
(9) Sonicate the homogenate on ice (10 sec. pulse + 50 sec. break x 6 times, 20% amplitude with a small tip of Branson sonifier (Fisher Dismembranator Model 500)). This step releases chromatin DNA from cells without solubilizing yolk proteins that make
tjmedwnn:请问25uM的氯喹是这样配的吗????大家好,我做质粒转染,说明书上说转染前要加25uM的氯喹。我买的氯喹分子量是515.86,请问大家如果换算成质量这怎么计算啊,是不是25/515.86=0.048μg然后称取0.048μg加进去啊,请大家多教教我,谢谢!丁香园网友szcsyan认为:一般配成stock,浓度高一点。比如25mM。用的时候再稀释。看你买的是多重的。比如X(mg)->; X/515.86 (毫摩)容在Vμl的DMSO(一般用DMSO溶)= 25mM
液,比如 RIPA,虽然裂解剧烈,但是无法维持蛋白天然构象,会破坏互作蛋白对。 如果自配,建议采用温和系统,比如 NP40/Triton 0.1%-1%;SDS ≤0.1%,盐离子≤150 mM 记得要加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂 结合液---利于蛋白之间的相互结合,要考虑孵育(结合)顺序 如果抗体和 beads 先孵育,建议 选择 pH 8.2(更常用)或者 pH 5.0 如果选用纯抗原作为诱饵蛋白 X 去拉裂解液中的靶蛋白 Y,抗体和抗原的结合 buffer 选择中性PBS/TBS 如果诱饵蛋白 X
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