41110-018823A赛默飞HYPREPHS C8 10

蛋白纯化反相柱的选择

相关专题 蛋白纯化技术专题 HP-RPC的选择首先要看蛋白质的分子 量，20kDa左右的一般用C4或C8，再小一点的可以用C18，太大的蛋白并不适于反相分离。C18通用性最好，但是有时候保留过强可能会导致收率较低。如果目的蛋白不是很针对，可以考虑通用性最强的C18柱。 一般来说，4.6mm的内径比较常见，250mm长的柱子比150mm的柱子分离度要好，无论对小肽还是蛋白都是这样。 其次要注意填料的孔径，80A左右的填料主要是用于小分

高效液相色谱柱

容量不足或不合适；　　8.重金属污染。 （3）如何解决峰形拖尾的问题 A．与化学有关的拖尾问题　　1.流动相中，加入30mM的三乙胺（用与碱性化合物）或醋酸胺（用与酸性化合物），未知化合物加醋酸三乙胺；　　2.如仍然拖尾，将三乙胺换为二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）；　　3.降低进样量至 B．与色谱柱有关的拖尾问题　　1.如柱头处有强保留的样品组分积聚，反相柱可用20倍柱体积的96%的二碌甲烷与4%甲醇，加1%氢氧化铵混合液冲洗，正向柱可用甲醇冲洗。　　2.使用保护柱。 C．与HPLC系统有关的峰拖尾

液相色谱柱安装与使用说明

。 2、色谱柱的安装： a、拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。 b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。 c、 按柱管上标示的流动相流向，将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许，建议在柱前使用保护柱)；柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1～0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底，然后顺时针拧紧空心螺钉，直到拧不动为止，再用