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文献和实验最近的一些分子生物学进展使得一些生物技术工具极大提高了生物发光和化学发光的检测和快速应用。这些发展方便了体外和体内持续检测生物过程(如基因表达,蛋白质-蛋白质相互间作用和疾病的进程),可应用于临床、诊断、和药物开发等。而且,结合发光酶或某些在基因水平有生物特异结合位点的发光蛋白发展了超敏感和选择性的生物分析工具,如重组细胞生物传感器,免疫分析和核酸杂交系统。发光分析信号的高度可侦测性使得它非常适合于微小化的生物分析装置(如微矩阵,微流设备和高密度的微孔板)以用于小量样品体积的基因和蛋白的高通
启动因子并孵育一段时间后开始,持续1-3min,一般应用于酶类项目,可以使用因数法来计算待测浓度。 生化检测原理示意图 过渡区对应是固定时间法,是终点法中存在一种特殊情况,指在时间-吸光度曲线上选择两个读数点,此两点既非反应初始吸光度亦非平衡点吸光度,这两点的吸光度差值用于结果计算。目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区对应的是终点法,按测光点的个数分为:一点终点法、两点终点法。 一点终点法是指在反应到达平衡点,即在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时,选择一个测光点计算待测
诺可被许多氧化剂氧化发光,其中H2o2最为常用。因发光反应速度较慢,需添加某些酶类或无机催化剂。酶类主要是辣根过氧化物酶(HRP),无机类包括O3、卤素及Fe3 、Cu2 、Co2 和它们的配合物。早期主要用于无机物和有机生物小分子的测定,灵敏度因标记后发光强度降低而降低。人们发现发光体系中加入某些酚类及其衍生物、胺类及其衍生物和苯基硼酸衍生物对体系的发光均有显著增强作用,发光强度可提高1000倍,并且“本底”发光显著降低,发光时间也得到延长。这些增强剂的使用,使化学发光免疫分析在蛋白、核酸分析领域得到
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