CLARITY相关试剂

CLARITY相关试剂

 

“CLARITY”作为新型的组织透明化技术，由斯坦福大学的Dr. Karl Deisseroth等发表于2013年3月的Nature杂志。由于CLARITY可用于荧光蛋白和抗体的免疫染色，有望用作分析大脑神经回路的有效工具。

此外，“PACT（被动CLARITY技术，passive clarity technique）”在2014年发表，通过去除双丙烯-酰胺和增加表面活性剂的浓度，无需电泳即可实现被动性的组织透明化。

FUJIFILM Wako可提供文献中实验方案中透明化步骤使用的试剂，如VA-044等试剂。

 

参考文献

1） Chung,K et al. : Nature., 497, 332(2013).

2） Yang, B. et al., : Cell, 158(4), 945(2014).

 

◆CLARITY实验方案示例

 ● 水凝胶单体溶液组成（Hydrogel Monomer Solution）

・VA-044・・・・・・・・・・・ 1 g

・40% 丙烯-酰胺 ・・・・・40 mL

・2% 双丙烯-酰胺・・・・10 mL

・10 × PBS ・・・・・・・・・・40 mL

・16% 多聚-甲醛・・ 100 mL

・皂苷・・・・・・・・・・・200 mg

・水・・・・・・・・・・・・・・210 mL

 

● 电泳buffer组成

・硼酸・・・123.66 g

・SDS・・・・400 g

・NaOH ・・・调至pH 8.5

・水・・・・・最多可加入10 L

 

● 脂质除去用电泳槽

・Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction（NIHON EIDO）

 

● 循环泵

・GPU-1、GPU-2（Azscience）

 

◆PACT 实验方案示例

● A4P0组成

· VA-044・・・・・・・・・・・0.25%

· 丙烯-酰胺 ・・・・・4%

· 含有上述成分的PBS溶液

 

● RIMS组成（RI 1.46）

· tween 20・・・0.1%

· 叠氮化Na・・・・0.01%

· 含有上述成分的0.02 M PBS・・・30 mL

· 碘海醇・・・40 g

· NaOH ・・・调整至pH7.5

 

◆应用数据

经CLARITY处理的小鼠大脑

经CLARITY处理的小鼠大脑成像

图2.  经CLARITY处理的Thy1-YFP（H Line）小鼠大脑的荧光观察

（A）从大脑皮层到海马体的３D观察图像；（B）大脑皮层Ⅴ层锥体细胞的树突图像

拍摄条件：双光子；使用设备：Olympus FV1000正置显微镜，25倍浸没物镜

 

CLARITY处理+使用抗体的小鼠大脑成像

图3. 经CLARITY处理后，使用Iba1抗体染色的Thy1-YFP（Ｈ线）小鼠大脑的荧光观察

（A）在大脑皮层的小胶质细胞３D观察图像；（B）从表层观察皮质层Ⅰ的图像

拍摄条件：单光子；使用设备：Olympus FV1000正置显微镜，25倍浸没物镜

 

 

点击此处查看相关产品页面：脂质除去用电泳槽使脑部透明化

点击此处查看相关产品页面：VA-044（聚合物引发剂）

 

◆产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级
017-08012	Acrylamide 丙烯-酰胺	25 g	for Electrophoresis
019-08011		100 g	for Electrophoresis
011-08015		500g	for Electrophoresis
138-06032	N,N'-Methylenebis(acrylamide) N,N'-亚甲基双（丙烯-酰胺）	25 g	for Electrophoresis
130-06031		100 g	for Electrophoresis
163-25265	10×PBS(-) 10×PBS(-)缓冲液	500 mL	for Cell Culture
160-16061	Para-formaldehyde 多-聚甲醛	100 g	for Tissue Fixation
162-16065		500g	for Tissue Fixation
193-18651	Saponin, from Soybeans 皂素	1 g	Wako 1st Grade
199-18653		5 g	Wako 1st Grade
223-02112	VA-044 2,2'-氮杂双（2-咪唑啉）二盐-酸盐	25 g	for Cellbiology
225-02111		100 g	for Cellbiology
023-02194	Boric Acid   硼酸	4 kg	试剂特级
027-02197		20 kg	试剂特级
027-02192		25 g	试剂特级
029-02191		100 g	试剂特级
021-02195		500 g	试剂特级
190-13982	Sodium Dodecyl Sulfate   十二烷基硫酸钠	25 g	分子生物学用
192-13981		100 g	分子生物学用
194-13985		500 g	分子生物学用

 

电泳槽

产品编号	产品名称	产品规格
631-26271	Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction 脂质除去用电泳槽	1 EA