细胞骨架关联蛋白2(CKAP2)重组蛋白

蛋白质结构与功能研究技术路线

蛋白质参与行使几乎所有的细胞功能。为了行使其特定的功能，蛋白质必须折叠成特定的结构。蛋白质结构研究可帮助对其功能机制的深入理解，也可帮助进行药物筛选及设计优化。蛋白质生物化学功能主要有结合、催化、分子开关以及细胞骨架等。哺乳动物细胞中蛋白质超过一半是酶。蛋白质结构的稳定性是其发挥生物功能必需的，三级结构由非共价和共价两类相互作用稳定，其中非共价相互作用为主。下表是稳定蛋白质结构的化学相互作用。蛋白质结构的柔性是其发挥功能必需的：蛋白质结构柔性对于其配体结合和催化是必需的；蛋白质三级结构的柔性

Western Blot，如何成功优化？

992)样本：人 HeLa 细胞 (Fig.6)A. 5% 脱脂奶粉封闭，一抗浓度：1.0 mg/mL，溶于 5% 脱脂奶粉和 0.15 M NaClB. 5% 脱脂奶粉封闭，一抗浓度：1.0 mg/mL，溶于 5% 脱脂奶粉和 0.5 M NaClFig.6我们为您推荐实验设计数据参考：裂解缓冲液蛋白定位裂解液推荐试剂盒全细胞NP-40 or RIPA全蛋白抽提试剂盒细胞质（可溶蛋白）Tris-HCl胞浆蛋白和核蛋白抽提试剂盒线粒体蛋白提取试剂盒细胞质（细胞骨架 等不溶蛋白）Tris

在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略

的表达系统会造成质粒的不稳定，细胞生长速度的下降和重组蛋白产量的降低[32，33]。Lanzer和Bujard曾对常用的lac启动子-操纵子系统进行了广泛的研究，证明操纵子放在启动子序列的不同位置会造成70倍差异的抑制。将17bp的操纵子置于-10和-35六聚体区之间所形成的抑制比将其放在-35区的上游或-10区的下游要高50-70倍[34]。 启动子的第三个特性是其简便和廉价的可诱导性。大量生产蛋白质最常用的启动子是热诱导（λPL）和化学诱导(trp)启动子。异丙基硫代-β-D-半乳糖