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文献和实验时间、在较高的菌密度下诱导都有利于包涵体的形成;在破菌和变性溶解时加入还原剂能够打开错配的二硫键;在复性液中加入二硫键异构酶、脯氨酸异构酶、分子伴侣和蛋白的辅助因子可以帮助重组蛋白折叠;精氨酸和高分子量PEG能减轻蛋白分子的聚集;尝试多种物理手段,如透析、快速稀释和柱上复性等,有时对复性有奇效。包涵体的表达相对简单,但其复性过程仍是依赖经验的,没有通用的方法可以套用。
性血小板减少性紫瘫和类风湿性关节炎(Prosorba)及带有抑制因子的血友病(linmunosorba)。在国内,蛋白A用于治疗系统性红斑狼疮、重症脂蛋白肾病、肾移植、多发性肌炎、重症肌无力和多发性硬化症。II、重组蛋白A的优势最早获得蛋白A的方法是从金黄色葡萄球菌中直接纯化获得,然而这种方法存在一些问题,例如:天然蛋白A只占菌体总蛋白的1.7%,难以满足大规模生产的需要,且金黄色葡萄球菌为致病菌,大规模生产危险性较大。为避免这些问题,目前人们采用基因工程技术来生产重组蛋白A,实现大规模生产蛋白A。天然
蛋白、含二硫键蛋白在体外成功复性。 包涵体形成的原因 重组蛋白在宿主系统中高水平表达时,无论是原核表达体系或真核表达体系甚至高等真核表达体系,都会形成包涵体[2]。主要因为在重组蛋白的表达过程中,缺乏某些蛋白质折叠过程中需要的酶和辅助因子,或环境不适,无法形成正确的次级键等原因形成的[3]。 1、 表达量过高,研究发现在低表达时很少形成包涵体,表达量越高越容易形成包涵体。原因可能是合成速度太快,以至于没有足够的时间进行折叠,二硫键不能正确配对,过多的蛋白间的非特异
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