Cytiva HiTrap™ IXSelect 高通量重组I

一文搞定纯化实验 7 大常见问题！

。 绝招四：纯化实验中常用的亲和标签汇总 Cytiva 提供多种亲和标签纯化产品，可用于纯化 His、GST、Strep（II）/ Twin-Strep、MBP 这些标签融合的重组蛋白。不同的标签蛋白在分子量、促溶性、结合特异性等方面各有特点，个性鲜明。 图 2：Cytiva 产品可用于纯化的主要亲和标签的性质对比 绝招五：纯化得到的组分中没有或很少目的 His 标签蛋白的主要原因分析 若目的 His 标签蛋白正常表达（使用

膜蛋白纯化攻略分享

1. 去垢剂类型和特点表 常用的去垢剂大概有十几种，根据膜蛋白分子量可选用下面两根预装柱进行快速筛选： 表 2. 用两根预装柱快速筛选去垢剂结果表   运行流速设为 0.5 mL/min，15 min 以内就可以筛选一个去垢剂，而且上样量 5-50μL，可节省样品。 标签 摸索得到合适的去垢剂之后，就可以进行常规的层析实验。 增溶之后，高速离心取上清过亲和层析柱，为了减少后续的处理步骤，往往设计较小的标签，一般使用 HIS 或者 Strep，如果使用 GST 标签，则需要引入酶切位点。   标签

最难搞的膜蛋白纯化攻略来了！

蛋白洗脱液； 浓缩后上样进行最后一步分子筛精纯，使用高分辨率层析柱 Superdex 200 Increase 10/300 GL，以得到高均一性和高纯度的 OmpA，利于后续的结构解析。   翻过膜蛋白纯化这座大山，以后纯化尽是坦途。 跃跃欲试了吗？那就去九大层析应用活动中先寻找心仪的装备吧！ Cytiva针对9种不同纯化应用，推出相应的层析组合产品，订购推荐的两步纯化或三步纯化套餐，即可获得精选填料或预装柱一份（52 种，任您选择），加速您的蛋白质研究！ 详情请查看