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- 2026年01月26日
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概述
Capto HiRes Q 和 Capto HiRes S 是预填充柱，用于通过离子交换层析高分辨率纯化蛋白和其他生物分子。它们非常适合制备用于结构研究和蛋白分析的高纯度蛋白。
• 高分辨率层析柱 - 用于实验室规模离子交换层析。
• 适用于制备高纯度蛋白-在使用低温电子显微镜或蛋白质晶体学等技术进行的结构研究（示例）中必不可少。
• 适用于研究或质量控制中的蛋白分析 - 例如，靶蛋白电荷变体的表征。
• 高质量层析柱 - 出色的可重现性、耐用性以及较高的化学和 pH 稳定性。
• 替换 Mono Q 和 Mono S 层析柱 - 提供相似或改进的分辨率，并且易于从一个层析柱平台过渡到另一个层析柱平台。
Capto HiRes 离子交换层析填料
Capto HiRes Q 和 Capto HiRes S 离子交换柱中填充的层析填料基于高流速琼脂糖基质和小粒径（平均粒径 9 μm）。
Capto HiRes Q 和 Capto HiRes S 分别是强阴离子和强阳离子交换剂，在建议的 pH 值 2 至 12 范围内层析期间离子交换特性保持恒定。
高效 IEX 层析柱规格
Capto HiRes Q 和 Capto HiRes S IEX 填料预填充在两种不同规格的高效 Tricorn 玻璃柱中。层析柱具有可轻松连接至 ÄKTA 层析系统或等效高效系统的配件。所有层析柱部件均具有生物相容性。
高分辨率蛋白纯化
在许多研究领域，例如在使用 X 射线晶体学或低温电子显微镜 (cryo-EM) 的结构生物学中，获得大小和电荷均一的生物分子对于阐明其结构至关重要。基于样本的电荷特性进行高分辨率分离对于确保样本电荷的同质性和研究的成功至关重要。Capto HiRes 层析柱能够将净电荷非常接近的蛋白和生物分子分离，这使这些层析柱非常适合这些应用。
蛋白分析
Capto HiRes 离子交换柱可用于蛋白分析，例如表征靶蛋白电荷变体的应用。
Capto Q HiRes 和 Capto S HiRes 替代 MonoBeads 层析柱
只需很少的修改或优化即可在 Capto HiRes Q 或 Capto HiRes S 层析柱上实现可在 Mono Q 或 Mono S 层析柱上进行的分离。在相同的实验条件下，预期 Capto HiRes 层析柱具有相似的填料选择性和改善的分辨率。即使在质量控制 (QC) 应用中，两种层析柱的相似选择性也可确保平稳过渡。
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文献和实验本身不带标签，则需要使用离子交换层析。 离子交换层析 离子交换层析推荐使用 RESOURCE 和 Capto HiRes 系列，能得到比较好的分辨率。不过要注意阴离子交换实验中不要添加阴离子型去垢剂，阳离子交换实验中则不能加入阳离子型去垢剂，以免影响层析柱载量。 离子交换之前需降低缓冲液中盐浓度，由于膜蛋白的特殊性，推荐使用脱盐柱进行此步骤，根据样品体积可选择 HiTrap Desalting 5 mL 或 HiPrep 26/10 Desalting 53 mL 两种常用柱型。最终上样体积不要超过
填料 离子交换层析填料主要有基架和配基两部分组成，其中基架的类型和粒径大小决定了填料的耐压、流速、分辨率等，粒径越小，填料的分辨率越高，而同等高度的层析柱带来的反压也相对较大，而配基是实际和样品中生物分子结合的基团。 离子交换填料的配基根据离子交换层析类型的不同分为阴离子交换配基及阳离子交换配基，常见的离子交换填料配基类型 （如表6)，在离子交换填料选择时，优先考虑强离子交换配基，如阴离子配基Q、阳离子配基S等，如果强离子交换配基无法得到满意的结果，也可以考虑使用弱离子交换配基为层析带来不同的选择
生物中过敏源多糖的纯化 样品前处理：海洋软体动物肉拨出洗净搅碎。 粗提：酶法处理并用 Sevage 法脱去大量的蛋白质。 层析纯化： 使用凝胶过滤层析进行初步分离，本例中使用的是 Sephacryl S-300，分离范围为 10KDa-1500KDa。可去除分子量差异较大的蛋白或核酸杂质，不同聚合度的多糖分子也可以得到有效分离。 选择 Capto Q 阴离子交换层析作为精细分离。多糖分子带有负电，因此选择高流速高载量的 Capto 系列阴离子交换填料分离效果更佳
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