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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C避光
- 保质期:
12个月
- 英文名:
One-step TUNEL Flow Cytometry Apoptosis Kit (Green, FITC)
- 供应商:
武汉益普生物科技有限公司
- 规格:
20Assays/50Assays/100Assays
| 规格: | 20Assays | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50Assays | 产品价格: | ¥2000.0 |
| 规格: | 100Assays | 产品价格: | ¥3600.0 |
| 中文名称 |
一步法TUNEL流式凋亡检测试剂盒(绿色,FITC)
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| 英文名称 |
One-step TUNEL Flow Cytometry Apoptosis Kit (Green, FITC)
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| 检测原理 |
细胞在发生凋亡时,会激活一些特异性的DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。使得凋亡细胞的DNA被切割成180~200bp片段,在琼脂糖凝胶上通常以180~200bp的阶梯状迁移。TdT酶(脱氧核糖核酸末端转移酶)将标记的dUTP连接到断裂DNA暴露的3'-OH末端,通过在这些末端添加荧光dUTP的方式来标记晚期凋亡细胞,从而可以通过流式细胞仪进行检测。
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| 检测方法 |
荧光法;流式
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| 样本类型 |
细胞
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| 检测时间 |
2.5-3 hours
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| 检测仪器 |
流式细胞仪
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| 荧光 |
FITC
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| Ex/Em |
490/530
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| Channel set |
FITC
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| 自备试剂 |
PBS(含1%BSA)缓冲液(pH7.2-7.4),PBS(含1% Saponin)缓冲液(pH7.2-7.6),4%多聚 甲醛(溶剂为PBS,pH7.2-7.6)(E-IR-R113),双蒸水
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| 保存温度 |
该产品可在-20°C避光条件下保存12个月。
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| 有效期 |
12个月
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| 运输条件 |
冰袋
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文献和实验流式课堂 | 细胞带有 GFP 荧光时,如何进行流式凋亡分析?
随着生物研究进入基因时代,转染技术的应用越来越广泛。在此过程中,通常会引入 GFP(绿色荧光蛋白)标签,去验证转染是否成功。 在之前的流式课堂中,我们曾多次提到过流式配色问题。今天,就来带大家看看,带有 GFP 标签的细胞,在流式凋亡检测中,应该如何配色和分析结果。 一、如何选择试剂盒 挑选试剂盒时,需要选择干扰少的荧光组合。GFP 的激发/发射波长为 488/510,通常在流式细胞仪中的检测通道为 FL1。因此,我们不能选择荧光标签为FL1检测通道的凋亡检测试剂盒,如 AF488
:敏感度高,适合于检测少量样本,小部分凋亡细胞。如临床活组织检测。 Fasta921 zhaohu552211 wrote:感谢大家!我现在做的是大鼠的肝脏组织,不是细胞,在这种情况下我可以做AnnexV嘛?我知道AnnexV可以做细胞的,如果可以做组织的话,我定那家的试剂盒,具体要注意什么? 听说这个电泳很难掌握条件!再次感谢大家! 兄弟,貌似做AnnexinV国产很多不能做组织,呵呵!我没做过组织,没经验,提供点资料看看!美国ADL Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒
的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
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