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　　吉奥蓝图是一家专注于生物医药的科研产品研究、开发、生产和销售的高科技企业。
　　公司自成立以来便一直秉承“精品、专业、诚信、便捷”的宗旨和理念，不断的开拓进取，务实创新，收录与典藏了近千种各类细胞株/系，公司细胞主要来源ATCC,ECACC,ScienCell, DSMZ, RIKEN 等，以及少数国内外科研机构建系。
　　其中自主研发建系各类示踪细胞、耐药株细胞、基因敲除细胞等百余种，客户遍及全国各地的医院、高校、药厂、科研机构等，产品质量与技术支持/服务体系深受广大客户信任和青眯。
　　目前公司以细胞生物学产品为主体，陆续建立与开发了：细胞STR检测试剂盒、PDX人源肿瘤细胞异体移植技术、荷瘤动物/特殊疾病动物模型、原代细胞系构建、耐药株筛选、Cas9基因敲除株、示踪细胞筛选等新产品和技术体系，以期为广大客户提供更多更好的科研产品和服务。
　　诚为基质为本协为赢，吉奥蓝图期待与您的合作……

　　在中国科学院昆明细胞库看到他们今年公布的错误鉴定和交叉污染的细胞，共 60 个细胞系，STR 检测结果和备检细胞系的名称相差甚远，大家赶紧去看看自己的细胞是否在列吧。
　　很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行, 这些细胞可能是从细胞库 (如美国 ATCC，American Type Culture Collection) 得来，也可能是受赠于其它研究人员，尤其在中国，目前细胞的传播太复杂，无序，很多都不是通过正规途径获得，如友情赠送等。
　　据统计，约有 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞会导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗失败等。不仅浪费大量时间、精力和金钱，还可能造成不可挽回的灾难性后果。为此，很多细胞库现在都要对提交来的细胞系进行鉴定，并对细胞系之间的交叉污染进行监测。
　　细胞系鉴定的必要性
　　1、各种杂志多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定，NIH 等权威机构也将细胞系鉴定作为基金申请的前提条件。
　　2011 年，美国专门颁布了细胞 STR 鉴定国家标准；
　　2014 年 12 月、2015 年 2 月 Science 杂志分别发表文章专题阐述细胞交叉污染和错误辨识的严重性；
　　2015 年 4 月 Nature 通知：Nature 旗下所有杂志将要求作者鉴定论文中所用细胞系；
　　2015 年 6 月即有报道称一科学家因用错细胞系，撤销 Nature 论文。
　　目前要求提供细胞鉴定数据的期刊有：Nature、BioTechniques、Cancer Research、Cancer Discovery、Clinical Cancer Research、Molecular Cancer Research、Cancer Prevention Research、International Journal of Cancer、Molecular Cancer Therapeutics、Cell Biochemistry and Biophysics、Cancer Epidemiology, Biomarkers & Prevention、In Vitro Cellular & Developmental Biology – Animal 等。
　　2、ATCC 和 FDA 要求对用于制药领域的实验中所使用的材料 — 诸如细胞系 — 应该进行「身份鉴定」和纯度测试。
　　此外，FDA 建议研究人员在培养细胞的较早阶段（细胞培养第一周）来鉴定细胞系的身份。细胞在被冻存前应再一次进行鉴定; 对于活跃生长的细胞, 每两个月应鉴定一次；文献发表前也应对细胞系身份进行鉴定。如果一个实验室使用不止一种细胞系, 则应在实验最开始时, 就要对所有的细胞系进行鉴定, 以便排除交叉污染。
　　3、2015 新版药典中，规定新建细胞系/株、细胞库（MCB、WCB）和生产终末细胞均应进行鉴别试验，以确认为本细胞，且无其他细胞的交叉污染。
　　细胞鉴别试验方法有多重，包括细胞形态、生物化学法（如同工酶试验）、免疫学检测（如同工酶试验）、免疫学检测（如组织相容性抗原、种特异性免疫血清）、细胞遗传学检测（如染色体核型、标记染色体检测）、遗传标志检测（如 DNA 指纹图谱，包括短串联重复序列（STR）、限制片段长度多态性（RFLP-PCR）和内含子多态性（EPIC-PCR）法等）以及其他方法（如杂交法、PCR 法、报告基因法等）。应至少选择上述一种或几种方法对细胞进行种属和细胞株间及专属特性的鉴别。（——《生物制品生产检定用动物细胞基质制备及鉴定规程》）
　　何时需要进行细胞系鉴定？
　　● 发表相关文章或申请课题经费
　　● 应用细胞系作为生物药研究的实验材料
　　● 使用细胞进行临床治疗（试验）
　　● 准备冻存保种或已冻存多年的细胞
　　● 一个涉及到细胞试验项目开始/结束
　　● 新得到的细胞或实验室传 5 代以上的细胞
　　● 细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大
　　细胞系鉴定方法
　　细胞培养中可以使用许多方法对交叉污染进行鉴定，如同功酶分析、染色体组分型、人淋巴细胞抗原 (HLA) 分型和扩增片段长度多态性 (AFLP) 的特征分析、STR 分析等。
　　近年来，大量研究表明 STR 基因分型方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的最有效和准确的方法之一，STR 基因分型已经被 ATCC 等细胞库组织作为金标准应用于细胞系鉴定 (ANSI/ATCC ASN-0002-2011)。美国的 ATCC 细胞库、德国的 DSMZ 细胞库以及日本的 JCRB 细胞库等为 STR 分型提供了各细胞株的数据供比对。
　　STR 基因位点由长度为 3~7 个碱基对的短串联重复序列组成，这些重复序列广泛存在于人类基因组中，可作为高度多态性标记，被称为细胞的 DNA 指纹，其可通过一定的计算方法，即可根据所得的 STR 分型结果与专业的细胞 STR 数据库比对从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。
　　STR 鉴定的试验流程
　　细胞 DNA 提取——多色荧光体系复合扩增——DNA 片段分离荧光信号检测——数据分析得到的基因分析和图谱——与数据库对比和结果分析——出具数据报告
　　看到这里，您是否 get 到了细胞系鉴定的新技能，迫不及待想看看自己冰箱里的细胞系还是不是当初的那个她呢？
　　没有 get 也不要紧，金开瑞已经为您准备好了各种细胞系鉴定服务，包括 ATCC 人源细胞系鉴定、干细胞和肿瘤细胞鉴定和细胞身份鉴定。您只需要提供细胞悬液或者基因组 DNA，我们就能交付给您 ATCC 比对结果、峰图、等位位点信息，您就可以知道她是不是您梦中那个她了哟！
　　我们的实力，邀您验证！科研路上，吉奥蓝图，携您同行！

细胞常规说明：
培养条件：89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况：不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议：1:2~1:3传代，2~3天换液1次
特别提醒：签收细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请务必重视。
 
悬浮细胞接收后的操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室 
2.拧松瓶盖，细胞瓶竖立培养8h（或过夜）
3.待细胞沉底后吸除上层液体（含碎片残渣，请小心操作），然后吸取沉底的细胞层（2ML左右转移到新的培养瓶，加入新鲜的完全培养基（如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%）继续培养
 
悬浮细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
1.将培养瓶/皿中的细胞重悬混匀
2.吸取2/3或者一半混匀后的细胞悬液到新的培养瓶/皿
3.分别在原瓶/皿和新分瓶的培养瓶/皿加入等量或者2倍的新鲜培养基，使细胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培养基PH值变化情况和细胞密度，定期半量换液（每周2-3次），待细胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重复1项操作或者冻存

贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜完全培养基，第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基，培养观察
3.若出现生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养

贴壁细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
1.吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加适量0.25%胰酶进行消化细胞（注意把握消化时间）
2.镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml 完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复113项作或者冻存