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99
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北京诺博莱德科技有限公司
产品品牌:Nobleryder
产品货号:NR224580
产品名称:改良GAM琼脂
产品规格:250g
产品简介:
用途:用于脆弱拟杆菌的分离培养。
成分(g/L)
月示胨 15.0
胰酪蛋白胨 10.0
大豆胨 3.0
酵母浸粉 5.0
牛肉粉 2.0
牛肝浸粉 1.2
可溶性淀粉 0.3
L-半胱氨酸 0.15
葡萄糖 3.0
磷酸二氢钾 2.5
消化血清粉 13.5
硫乙醇酸钠 0.15
氯化钠 3.0
琼脂 13.0
pH值7.0±0.2 25℃
添加剂:每瓶需配套添加 4盒 0.02%维生素K1溶液 和 4盒改良GAM琼脂抑菌剂 (含三种抗生素)和 氯化血红素和脱纤维兔血。每200ml改良GAM琼脂需要添加1支0.02%维生素K1,1支改良GAM琼脂抑菌剂,氯化血红素0.5g,脱纤维兔血14ml。
用 法:
称取本品71.8克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,115℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右,加入无菌0.1%维生素K1溶液1ml,氯化血红素2.5g,脱纤维兔血70ml,卡那霉素100mg,新霉素100 mg,万古霉素1 mg,混匀,倾入无菌平皿。
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文献和实验【原理】硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐: 产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下:生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g﹣1·h﹣1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单,适合快速、多组测定。离体法复杂,但重复性较好。【仪器与用具】分光光度计;真空抽气
-60度, 尽可能保证上下游引物的Tm值一致,一般不超过2度。 如果引物中的G+C含量相对偏低,则可以使引物长度稍长,而保证一定的退火温度。Tm=2(A+T)+4(C+G)4. 引物的GC含量有效引物中(G+C)的比例为40-60%,过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。5. 引物自身引物间3‘端的互补、二聚体或发夹结构也可能导致PCR反应失败任务用绿色荧光蛋白(GFP)标记蛋白NR1 引物要求 PCR扩增GFP GFP两边添加BamHI酶切位点 保证NR1的阅读
Protocol for competitive RT-PCR
that containes a T7 RNA promoter sequence. The in vitro transcription of the cloned fragments is performed using T7 RNA polymerase (e.g. Gibco BRL). The internal standard RNA is then treated with RNase-free DNase I (e.g. Gibco BRL) to remove the plasmid DNA
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