水疗中心的设计

PCR 问题整理及提高 PCR 扩增特异性的方法总结

增加模板用量 提高 PCR 反应特异性的方法 1. 引物的设计 引物最好在模板 cDNA 的保守区设计，长度 15-30bp，GC 含量小于 60%，3’端不超过连续三个 G 或 C，碱基分 布错落有致，避免引物自身形成二聚体，设计完成之后，需进行 BLAST 检测，如果与其他基因不具有互补性，则可以进行下一步实验。 2. 降落 PCR 降落 PCR 是一种简单的降低非特异性产物的 PCR，最大的优点就是可以降低实验耗时，同时又可以优化实验的步骤。引物的设计决定退火温度，退火温度过高会使 PCR

新突破|大牛告诉你 肿瘤迁移研究要这么搞

肿瘤迁移模型通常是在具有免疫缺陷的小鼠上采用细胞系异种移植的方式来构建。 在新环境下，有关肿瘤细胞习性的大量信息通常都是通过迁移模型来获取的。 有一种被称为「肿瘤中心论」的设计方法，在动物组织中，其主要研究对象是人肿瘤传播的细胞自发影响因素。实际上，采用复杂的动物模型做为肿瘤的「培养皿」，其不仅为肿瘤生长提供了丰富的营养物质还为肿瘤的生存提供了支持。作为全身性疾病，转基因或基因敲除鼠癌症模型可以用来研究肿瘤迁移速度，并为研究癌症发展史提供了一种辅助手段。本文详细

Nat Methods：殷昊团队开发不依赖 DNA 供体高效靶向插入基因组的新方法：GRAND editing

分裂细胞中实现片段插入，但由于存在效率低、副产物比率高的问题，无法达到有效插入2,3。因此，寻找一个不依赖细胞周期、高效靶向插入 DNA 片段的工具有重要意义。 2022 年 2 月 28 号，武汉大学医学研究院、教育部免疫和代谢前沿科学中心殷昊课题组在 Nature Methods 上发表了题为 Efficient targeted insertion of large DNA fragments without DNA donors 的研究论文，在 Prime editing 基础上，开发了一个由全新