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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
1年
- 英文名:
Acetate buffer (0.1 mol/L, pH 4.6)
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃
- 规格:
500mL/1L
| 规格: | 500mL | 产品价格: | ¥220.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1L | 产品价格: | ¥280.0 |
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文献和实验一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白,辛酸为短链脂肪酸,在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质;第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来,操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE电泳检测能得到电泳纯度较高的Ig。三、仪器、原料和试剂1、仪器磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。2、原料抗血清(兔抗鸡血清)。3、试剂(1) 乙酸-乙酸钠缓冲液:60mmol/L,pH4
胺,盐酸调pH至8.0)的烧瓶内,室温孵育2h或者4℃过夜。8.在烧结漏斗中依次用100ml偶联缓冲液100乙酸盐缓冲液(0.1mol/L乙酸钠,0.5mol/L氯化钠,pH4.0)洗偶联介质一次,重复此步骤四次。9.如果不准备立即使用偶联介质,影使用含0.02%叠氮钠的偶联缓冲液再洗一次。装柱1.选柱:不宜过大,一般以1.5×15cm的层析柱可装偶联蛋白的琼脂糖约30ml。2.装柱:将已与蛋白偶联的琼脂糖装入层析柱内,拧紧下口夹,让其下沉,数分钟后松开下口夹,使溶液约以1ml/min的速度流出
剂,以供读者选用。1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3)多聚甲醛 40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加热至60℃左右,持续搅拌(或磁力搅拌)使粉末完全溶解,通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮,最后补足0.1mol/L的PB于1000ml,充分混匀。该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究,最好是动物经灌注固定取材后,继续
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