- ￥1035 - 1218
- gelatins/江蓝纯
- JC_CC5583
- 国内
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
2×Fast HiFi PCR MasterMix(不含染料)
- 保质期：
3年
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
1 ml / 5×1 ml
| 规格： | 1 ml | 产品价格： | ￥1218.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5×1 ml | 产品价格： | ￥1035.0 |
2×Fast HiFi PCR MasterMix(不含染料)
产品特点
本产品包含超快速高保真 Pfu DNA 聚合酶，扩增速度大约是普通Pfu DNA聚合酶的10-20 倍，是 Taq DNA 聚合酶的 2-6 倍，不仅缩短了延伸时间，而且提高了酶的扩增性能，使其能够在更短的时间里扩增更长的模板。含有 dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂，浓度为 2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度地减少人为误差。
它具有下列特点：
1. 扩增速度快，5-10s/kb，保真性高；
2. 多次冻融或长期放于 4℃不会影响活性；
3. 应用简便，减少误差，降低了对 PCR 条件的要求；
4. 含染料的 MasterMix 产品在 PCR 结束后可以直接上样电泳。
成分规格
|
目录号 |
产品名称 |
规格 |
|
JK_C63638 |
2×Fast HiFi PCR MasterMix(含染料) |
1ml/5×1ml |
|
JK_C63639 |
2×Fast HiFi PCR MasterMix(不含染料) |
1ml/5×1ml |
|
-20℃可长期保存12个月 | ||
|
本产品仅供科研使用 ，不得用于其它用途 | ||
使用方法
（注 意：以下举例为常规PCR体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）
1. PCR体系
推荐反应体系(25μl)
|
试剂 |
用量 |
|
模板ＤＮＡ |
＜1ug |
|
Primer1(10μM) |
0.5μl |
|
Primer2(10μM) |
0.5μl |
|
2×Taq Plus PCR MasterMix |
12.5μl |
|
ddH2O |
Up to 25μl |
（注 意：引物浓度请以终浓度 0.1 - 1.0 uM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系）
2. PCR程序
|
过程 |
温度 |
时间 | |
|
预变性 |
94℃ |
2min | |
|
25－35cycles |
变性 |
94℃ |
10sec |
|
退火 |
55-65℃ |
10sec | |
|
延伸 |
72℃ |
1kb/10sec | |
|
终延伸 |
72℃ |
2min | |
注 意：
Ａ：扩增> 5 kb 的产物时，建议使用 95℃ 5 min 预变性处理。
B-1：退火温度：最适 Tm 与引物间的平均温度相近，若引物间 Tm 值偏差较大，最适Tm用引物的最低 Tm+1-2℃）。
B-2：退火时间：对于含兼并引物、复杂模板的扩增，建议退火时间延长至30s。c：适合的延伸温度：68-75℃；推荐的延伸速度：10-15 s/kb；质粒等简单模板：5-10 s/kb；常规基因组模板：10-15 s/kb；复杂模板、脏模板：15-25 s/kb；略微增加延伸时间（5-10 s/kb）有利于提高低浓度、复杂模板 PCR 的产量，但总延伸时间不超过30s/kb）。
3. 结果检测
反应结束后取5μl反应产物，加入适量上样缓冲液（含染料的不用加），然后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
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文献和实验μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer （ 10 μM 1-5 μL 下游 Primer （ 10 μM ） 1-5 μL 模板 lamid DNA ～ 50 ng genomic DNA ～ 1000 ng cDNA ～ 500 ng 粗提液 ～ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例： 一、plasmid DNA 扩增 1．提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100，250，500
【资源】一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料
替代 SYBR Green 1 ，毋须改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备 Fast-Plus EvaGreenqPCR试剂盒一种既适用于快速循环 qPCR 又适用于高分辨率熔解曲线（ HRM ）分析的 PCR 试剂盒。技术特点Fast-Plus EvaGreen® qPCR Master Mix 是一种既适用于快速循环 qPCR 又适用于高分辨率熔解曲线（HRM）分析的 PCR 试剂。该试剂体系囊括了PCR领域的两项突破性技术：EvaGreen® PCR 染料和 Cheetah Taq
实时荧光定量 PCR 技术（Quantitative Real-time PCR，简称 qPCR）是在 PCR 扩增过程中，通过实时监测荧光信号的变化，达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断，动物疾病监测，食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延，qPCR 技术更是因其检测通量高，速度快，操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果，我们需要注意哪些方面呢？其实决定一次实验成功
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