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87787/87788
| 规格: | 87787 | 产品价格: | ¥1348.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 87788 | 产品价格: | ¥2904.0 |
| 货号 | 数量 |
|---|---|
| 87787 | 100 mL |
| 87788 | 250 mL |
Thermo Scientific Pierce IP 裂解缓冲液针对细胞裂解物的产量、纯度以及与免疫沉淀(IP 和 Co-IP)(作为与细胞裂解物相关的下游应用)的兼容性进行了优化。
IP 裂解缓冲液的特点:
•经过优化,可与各种免疫沉淀和牵出测定兼容
• 与各种蛋白测定、报告基因测定和免疫检测程序兼容
• 现成的配方,可有效提取细胞质、细胞膜和细胞核蛋白
• 温和的配方可帮助保持蛋白复合物用于免疫共沉淀
• 不会释放可导致样品高粘性的基因组 DNA
IP 裂解缓冲液是一种基于改良 RIPA 缓冲液配方(不含 SDS)的哺乳动物全细胞裂解试剂。这种中等强度裂解缓冲液可高效溶解细胞蛋白,但不会像一般 RIPA 缓冲液那样释放染色体组 DNA 或破坏蛋白复合物。Pierce IP 裂解缓冲液经过特殊配方,可用于各种牵出测定和免疫沉淀检测。
Pierce IP 裂解缓冲液可从孔板细胞和经悬浮培养液粒化的细胞中有效裂解出培养的哺乳动物细胞。该裂解缓冲液经过优化可用于各种牵出测定和免疫沉淀检测,还可与很多其他应用兼容,包括 Thermo Scientific Pierce BCA 和 660 nm 蛋白测定、蛋白纯化和各种免疫检测(如 ELISA、Western 印迹)。
Pierce IP 裂解缓冲液由 25 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1% NP-40 和 5% 甘油组成。该缓冲液不含蛋白酶或磷酸酶抑制剂;但是如果需要,可在使用前添加各种抑制剂,如 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物或磷酸酶抑制剂混合物,以防止蛋白水解并保持蛋白磷酸化。
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文献和实验了一线技术支持常被问到的问题,希望这篇纯干货能帮助大家顺利升级打怪,早日驾驭 IP、co-IP。 IP、co-IP、pull-down 简介 IP(Immunoprecipitation),免疫沉淀:是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等基质上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的一种方法 Co-IP(co-Immunoprecipitation),免疫共沉淀: co-IP 是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法,其基本实验流程和IP类似,通过使用诱饵蛋白(IP 中的抗原,bait protein)特异
了编码 HA-BDCA-2 载体的小鼠 B 前体细胞后,提取的蛋白使用 SDS-PAGE 的方法进行检测。 蛋白免疫共沉淀(co-IP)与染色质免疫共沉淀(ChIP) μMACS Protein A/G MicroBeads 专为蛋白质免疫共沉淀分析而开发,免疫复合物 30 分钟即可形成并得到磁性分离。 在强磁场的分离柱中进行润洗,可保证背景充分去除,即便是弱结合的蛋白复合物依然可得到充分分离。传统免疫共沉淀工作流程需要抗体孵育过夜,相比之下 MACS Techology 可令实验时间缩短
量的抗体,同时对免疫沉淀体系也需要有严格的控制指标。免疫沉淀实验从:蛋白样品处理;抗体-agarose beads孵育;抗体-agarose beads复合物洗涤到最后的鉴定,每步都非常关键,需要严格控制实验流程中每个关键步骤的质量,才能最终达到你的实验目的。 IP实验步骤 基本实验步骤 1. 收获细胞,加入适量细胞IP裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上或者4℃裂解30 min, 12 000g离心30 min后取上清; 2. 取少量裂解液以备Western blot分析,剩余
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