- ￥140 - 563
- 晶抗生物
- JK_C6365
- 国内
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
2×Pfu PCR MasterMix(不含染料)
- 保质期：
3年
- 保存条件：
低温保存
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存：
大量
- 规格：
1 ml / 5×1 ml
| 规格： | 1 ml | 产品价格： | ￥140.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5×1 ml | 产品价格： | ￥563.0 |
2×Pfu PCR MasterMix(不含染料)
产品特点
本产品包含 Pfu DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为 2 ×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。适用于高保真 PCR、复杂模板如GC 含量高（>60%），有二级结构的扩增和大规模基因检测。
它具有下列特点：
1. 显著提高 PCR 的特异性和灵敏度；
2. 多次冻融或长期放于 4℃不会影响活性；
3. 快速简便，大大降低劳动强度和取样误差，而且加入了高性能的PCR增强剂和优化剂，降低了对 PCR 条件的要求；
4. 分含染料和不含染料两种体系。含染料的 MasterMix 产品在PCR结束后可以直接电泳，无需加入上样缓冲液。
成分规格
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目录号 |
产品名称 |
规格 |
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JK_C63634 |
2×Pfu PCR MasterMix(含染料) |
1ml/5×1ml |
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JK_C63635 |
2×Pfu PCR MasterMix(不含染料) |
1ml/5×1ml |
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-20℃可长期保存，多次冻融不会影响活性。如需经常使用，可存放于 4℃。 | ||
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本产品仅供科研使用 ，不得用于其它用途 | ||
使用方法
（注 意：以下举例为常规PCR体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）
1. PCR体系
推荐反应体系(20μl)
（注 意：引物浓度请以终浓度 0.1 - 1.0 uM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系）
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试剂 |
用量 |
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模板ＤＮＡ |
＜1ug |
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Primer1(10μM) |
0.5μl |
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Primer2(10μM) |
0.5μl |
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2×Pfu PCR MasterMix |
10μl |
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ddH2O |
Up to 20μl |
注 意：
A. 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
B. 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Pfu DNA Polymerase 的扩增效率为1 kb/min。
C. 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数）
3. 结果检测
反应结束后取5μl反应产物，加入适量上样缓冲液（含染料的不用加），然后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
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文献和实验μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer （ 10 μM 1-5 μL 下游 Primer （ 10 μM ） 1-5 μL 模板 lamid DNA ～ 50 ng genomic DNA ～ 1000 ng cDNA ～ 500 ng 粗提液 ～ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例： 一、plasmid DNA 扩增 1．提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100，250，500
请教：高保真酶 关于taq plus 求教Pfu酶作PCR的要求 Pfu扩增求救！！！！ 请问哪一种高保真DNA聚合酶比较好呢？ Pfu DNA 聚合酶的问题 pfu的扩增条件！ 关于高保真酶问题？ 求助：高保真酶 关于高保真酶 关于高保真的酶 pfu高保真酶怎么那么难用？ Pfu DNA聚合酶------常见问题 请教如何做病毒的 pfu 请教Pfu扩增2kb片段 高保真酶咋还不如普通的Taq酶? 请教关于高保真酶问题 哪个公司
总的说来，荧光检测技术可大致分为两大类：通用型的荧光染料检测法和高特异性的荧光探针法。 前者主要是利用荧光染料(如SYBR Green I)与双链DNA分子结合发光的特性来指示扩增产物的增加，优点是：无需另外设计荧光探针 ，无需特别优化条件，简便易行，成本较低，能适用于任何一款定量 PCR 仪，缺点是专一性不如探针法； 而后者则利用荧光标记的特异性探针或者引物来识别模版，优点是特异性更高，适用于扩增序列专一检测(见下表)，不过增加了荧光探针的成本。
