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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
999
- 供应商:
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
- 肿瘤类型:
详见说明书或咨询客服
- 细胞类型:
详见说明书或咨询客服
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
骨髓
- 相关疾病:
详见说明书或咨询客服
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
详见说明书或咨询客服
- 细胞形态:
圆形
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书或咨询客服
- 器官来源:
详见说明书或咨询客服
- 运输方式:
常温
- 年限:
不限
- 生长状态:
详见说明书或咨询客服
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
人骨髓单个核细胞
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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人骨髓单个核细胞
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组织来源
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骨髓
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商品货号
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ORCH247
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种属来源
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人
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产品规格
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5×105cells/T25细胞培养瓶
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细胞简介
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人骨髓单个核细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单个核细胞是骨髓中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是(mononuclear cell)单个核细胞,而不是(Monocyte)单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与骨髓其他细胞不同,利用一定比例聚蔗糖和泛影酸钠形成的等渗溶液作密度梯度离心,使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,可将各种血细胞与单个核细胞分离。
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包被条件
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-
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培养基
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含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
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换液频率
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每2-3天换液一次
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生长特性
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半贴壁半悬浮
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细胞形态
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圆形
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传代特性
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不增殖;不传代
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消化液
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0.25%胰蛋白酶
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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方法简介:澳睿赛实验室分离的人骨髓单个核细胞采用取骨髓、通过密度梯度离心法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:澳睿赛实验室分离的人骨髓单个核细胞经检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
人骨髓单个核细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
人骨髓单个核细胞是一种半贴壁半悬浮细胞,细胞形态呈圆形,在澳睿赛生物技术部标准操作流程下,细胞不增殖;不传代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 半贴壁半悬浮细胞处理
1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中,用吸管吸取PBS,吹洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液;经1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀①;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,收集细胞悬液至离心管中;经1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀②;
4)吸取5ml新鲜完全培养基,重悬细胞沉淀①、细胞沉淀②,把①、②混匀。
5)用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,按实验需求接种于实验器皿内,然后补充适量新鲜的完全培养基,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
6)待细胞状态稳定后,用于实验;可以每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技
术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
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人骨髓单个核细胞
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