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- 2026年04月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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200
- 保质期：
一年
- 供应商：
武汉金开瑞生物工程有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
10T
实验原理
酵母核体系双杂交技术是基于对真核细胞转录因子特别是酵母转录因子GAL4性质的研究，GAL4包括两个结构域，即DNA结合结构域（DNA-binding domain，BD）和转录激活结构域（Activating domain，AD）。BD能够识别位于GAL4效应基因（GAL4-responsive gene）的上游激活序列（Upstream activating sequence，UAS）并与之结合，AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD分别单独作用并不能激活转录，但是当二者在空间上充分接近时，则呈现完整的GAL4转录因子活性并可激活UAS下游启动子，转录启动子下游基因并使其表达。
Y2HGold菌株是GAL4系统酵母双杂实验用菌株，可直接转化质粒进行蛋白互作验证。Y2HGold-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：pGBKT7和pGADT7。质粒 pGBKT7的筛选标志为 TRP1，用于表达 BD (来自酵母转录因子GAL4 N端 1~174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；质粒 pGADT7的筛选标志为LEU，用于表达AD（GAL4 C端768~881位氨基酸）与目标蛋白（Prey）的融合蛋白。本试剂盒提供的产品包含了酵母双杂验证过程中用到的各种培养基以及酵母转化试剂，操作简单，能用于10对双杂的互作验证（质粒需自行扩繁）。
试剂盒组分
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文献和实验佚名 根据我国神经生理学家张香桐的意见，丘脑的各种细胞群大致可以分为三大类（图10-21） 图10-21右侧丘脑主要核团示意图 1：网状核（大部分已除去，只显示前面一部分） 2：前核3：前腹核 4：苍白球传来纤维 5：外侧腹核 6：外髓板 7：小脑传来纤维8：内髓板及髓板内核群
特异投射系统是指丘脑的外侧核、外侧膝状体、内侧膝状体投射到大脑皮层的纤维联系。前文已提到，经典的感觉传导通路是由三个神经元接替而完成的，位于丘脑的第三级神经元就在外侧核内。但是，视觉与听觉传导通路则较复杂。视觉传导通路包括视杆和视锥细胞在内，为四个神经元接替。听觉传导通路从外周到大脑皮层，很难肯定经过几个神经元接替。这些感觉在丘脑外侧核、外侧膝状体、内侧膝状体换神经元后，投射到大脑皮层的特定感觉区，产生特定的感觉。所以，一般经典的感觉传导通路就是通过丘脑的特异投射系统而后作用
最近 WB 的结果趋势不是很理想，因为给了蛋白 B 的抑制剂蛋白 B 却没有明显变化。于是大伙儿一合计，可能需要再看看蛋白质之间的相互作用，会不会是抑制剂影响了蛋白 B 和蛋白 C 之间的结合，而不是直接导致蛋白 B 的降解。大家都知道研究蛋白质相互作用的三大经典方法是：酵母双杂交（Y2 H），免疫共沉淀（CoIP）和 GST pulldown。结合我们课题组的这个实验，因为只需看看蛋白 B 和 C 之间的结合，而且已知蛋白 B 和 C 是会结合的，所以可能用 CoIP 最简便。那么问题
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